念珠菌性外阴阴道炎菌种的分布、快速鉴定法的探究.pdfVIP

目 录 1 念珠菌性外阴阴道炎菌种的分布、快速鉴定法的研究……1 1.1 中文摘要………………………………………………………1 1.2 英文摘要………………………………………………………4 1.3 前言……………………………………………………………7 1.4 第一部分 念珠菌性外阴阴道炎病临床致病株的鉴定及临床 分析……………………………………………………………11 1.4.1 材料与方法……………………………………………………12 1.4.2 结果……………………………………………………………17 1.4.3 讨论……………………………………………………………21 1.5 第二部分 念珠菌性外阴阴道炎病菌种快速鉴定方法的建 立………………………………………………………………26 1.5.1 材料与方法……………………………………………………27 1.5.2 结果……………………………………………………………29 1.5.3 讨论……………………………………………………………30 1.6 结论……………………………………………………………37 1.7 参考文献………………………………………………………38 1.8 英汉缩略词对照表……………………………………………43 2 致谢……………………………………………………………45 3 白念珠菌致病相关的水解酶（综述）………………………46 念珠菌性外阴阴道炎菌种的分布、快速鉴定法的研究 摘 要 第一部分 念珠菌性外阴阴道炎病临床致病株的鉴定及临床分析 目的：本研究通过对念珠菌性外阴阴道炎临床致病株进行生物学分类、基 因鉴定，了解成都地区女性阴道炎感染菌种分布情况。分析不同念珠菌种 临床致病株分布和发病特点，为临床提供由念珠菌感染的念珠菌性外阴阴 道炎的分子流行病学资料，提高临床诊断及防治水平。 方法：收集2012 年7 月至2013 年1 月四川省人民医院皮肤性病研究所和 成都市计划生育指导所门诊收治的念珠菌性外阴阴道炎患者阴道分泌物标 本，将有典型症状（如豆渣样白带和外阴瘙痒等）的患者，取阴道后穹隆 处的分泌物送检，真菌镜检发现菌丝或孢子，并培养鉴定为念珠菌阳性的 患者确诊为外阴阴道念珠菌病（VVC）组；一年反复发作四次及以上者，诊 断为复发性外阴阴道念珠菌病（RVVC）组；患者无症状，但真菌培养鉴定 为念珠菌阳性的患者确定为携带者（H）组。对阳性标本行沙氏葡萄糖琼脂 培养基（SDA）分离培养，初步鉴定为念珠菌，然后对培养的念珠菌提取 DNA，并采用真菌通用引物ITSl、ITS2 对外阴阴道念珠菌病的病原菌rDNA （核糖体DNA）的ITS1-2 区进行PCR 扩增，测序后通过Blast 比对，确定 菌种。结合患者年龄、发病频率等一般资料，初步分析不同念珠菌种临床 致病株的分布和发病特点。 结果：1、PCR 能快速、准确鉴定临床标本中的致病真菌。本实验一共收集 151 个镜检阳性标本，培养出112 个标本，104 例DNA 鉴定成功。其中白念 珠菌90 株(86.54%)，光滑念珠菌13 株（12.5%），链格孢菌1 株（0.96%）。 1 2、白念珠菌是各组研究对象中检出率最高的菌种，是造成感染的主要菌种, 光滑念珠菌是引起感染最常见的非白念珠菌菌种。在各组检测阳性的菌种 中，白念珠菌在VVC 初发组占有比例90.48%、RVVC 组占有比例86.21%、H 组占有比例 50%，说明白念珠菌是人类阴道常驻菌群，一旦致病，分布率 显著上升。光滑念珠菌在 VVC 初发组占有比例 4.76%、RVVC 组占有比例 10.34%、H 组占有比例25%，说明光滑念珠菌致病力较白念珠菌弱，更多时 候作为共生菌寄生于人体，少数情况下致病。H 组可以携带白念珠菌以及 光滑念珠菌。链格孢菌是常见的污染菌，在环境中广泛存在，意义不大。3、 本实验发现再次感染的念珠菌性外阴阴道炎中白念珠菌感染率最高，达 80.77%。4、白念珠菌感染与年龄的关系：在25-30 岁,白念珠菌感染率最 高，＜25 岁和41-45 岁的年龄段次之。 结论： 1