结核分枝杆菌基因突变及耐异烟肼的相关性及其检测.pdfVIP

遵义医。’≥院硕十学ft毕Ikif三文 结核分枝杆凶旗冈突变．0耐肄烟H}}的州关性及其检测 论文部分 题目：结核分枝杆菌基因突变与耐异烟肼 的相关性及其检测 捅 要 目的分析结核分枝杆菌katG、inhA基因突变与耐异烟肼的相关性，并通过核酸薄 膜导流杂交技术快速检测基因突变，初步判断有无结核分枝杆菌感染并提示其耐药 性。方法对贵州省遵义医学院附属医院呼吸二科结核病区2007年6月至2008年 11月期间住院病人进行结核分枝杆菌培养、菌型鉴定及药物敏感性试验，在培养菌 落中提取细菌DNA，进行PCR扩增，将所有扩增产物进行DNA序列分析，并将 DNA测序结果与药物敏感性试验结果对比；将测序中检测到的与耐异烟肼相关的 katG基因315位点的突变形式设计成寡核苷酸探针，并制成载有探针的薄膜，对上 述87例标本中存在katG基因315位点突变的18例菌株和15例katG基因野生型菌 株共33例进行杂交测试。结果87例菌株经鉴定均为结核分枝杆菌，30(34．5％) 例为耐异烟肼菌株，57(65．5％)例为异烟肼敏感菌株；87株结核分枝杆菌菌株中 Pr0232Gln)为国内外首次发现，已被美国，欧洲和同本的基因库收录。杂交测试的 相比，其阳性预测值、阴性预测值、敏感度、特异度分别为100％、86．7％、90％、100％。 结论结核分枝杆菌katG、inhA基因突变与异烟肼耐药相关，可通过检测基因突变 初步判断结核分枝杆菌耐药性，核酸薄膜导流杂交技术检测基因突变高效快速，为 结核分枝杆菌耐药性的快速检测奠定了基础。 【关键词】结核分枝杆菌；异烟肼；耐药；突变；导流杂交 道义医学院硕f?学似毕业沦文 结核分枝朴凶摹冈突变与耐异烟肼的卡}{关性及其枪测 英文摘要 Abstract the between toisoniazidandmutationsin ObjectiveStudyrelationshipdrug-resistant tuberculosis the mutationsin isolates，and Mycobacterium rapidclassifygene isoniazid-resistantclinical tuberculosisisolates Mycobacterium through Macroanay Hybridization 87clinical tuberculosisisolatesfrom Technique．MethodsMycobacterium Affiliated of Medical inGuizhouProvincewereusedfor HospitalZunyi College drug andmutation of susceptibilitytesting、PCR sequenceanalysis totalof18isolateswithkatG 315mutantsidein87clinical inhA(175bp)genes．A gene tuberculosis 15isolatesof katG wereused Mycobacteriumisolates，and