聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒载P16a基因的制备和在喉癌细胞中的表达.pdfVIP

聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒载P16a基因的制备及在喉癌细胞 中的表达 摘要 目的：制备携带P16a基因的聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒并在喉癌细胞 中进行表达。 方法： 选用乳化聚合法制备聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒(PBCA． NPs)，以激光粒度分析仪及透射电子显微镜分析纳米粒的形 态和粒径。用阳离子表面活性剂十六烷基三乙基溴化铵 (CTAB)对纳米粒进行表面修饰。构建真核表达载体 接，转染喉癌细胞Hep一2，荧光显微镜检测转染效率，蛋白印 迹法检验P16a基因的表达，流式细胞术检测细胞凋亡率。 结果： 所制PBCA．NPs粒径均匀、Zeta电位较高，较为理想：重组 16a经过酶切鉴定及测序后，表明真核表 质粒pIRES2-EGFP-P 效转染喉癌细胞，蛋白印迹检测表明转染后喉癌细胞能够表达外 源P16a基因，外源P16a基因的表达能有效抑制喉癌细胞的恶 性增殖并能诱导细胞凋亡。 结论： 聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒可以作为一种良好的基因载体，为 喉癌的基因治疗提供了新思路。 6 关键词t聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒；P1a基因：喉癌细胞 4 Constructionof polybutycyanocrylate P16a and in nanoparticles(PBCA—NPs)loaded gene expression cell Hep一2 Abstract To Objectivepreparepolybutycyanocrylate 1 as loadedP6a the to the gene genedelivery system，andexpress P16a in cellline． proteinHep-2 MethodsPBCA-NPswere the preparedby em}tlsion polymerization method．SurfaceofPBCA-NPsWas transmission surveyedby electron distribution micrographs(鳓thegrain andzeta of were PBCA-NPsdeterminedwiththelaser potentials grain