他可莫司滴眼液治疗角膜碱烧伤的免疫学机制探究.pdfVIP

摘要 摘要 目的：研究他可莫司(FK506)滴眼液治疗大鼠角膜碱烧伤的药物有效浓度及 给药方案，评价其抑制角膜碱烧伤后免疫炎症反应，改善角膜微环境的效能， 并探讨其作用机制。 方法：NaOH滤纸片敷贴法制作大鼠角膜中度碱烧伤模型，96只wistar大鼠随 机分为A、B、C、D四组，A、B、C组为治疗组，给予浓度0．05％、0．1％、 0．5％FK506滴眼液治疗，4次／天，D组为阴性对照组。观察不同组别大鼠角膜 透明性、基质融解程度以及新生血管形成情况。在不同时间点(第3，7，14， 30d)处死大鼠取下角膜，HE染色分析角膜组织结构的变化，比较炎症细胞浸 润程度的差异，免疫荧光法检测CD4／CD8阳性T细胞时空表达规律。 结果：碱液滤纸片烧伤角膜后，角膜雾状水肿，烧伤区角膜上皮缺失，基质融 解形成溃疡，角膜缘血管扩张，后期形成新生血管，角膜失去透明性。FK506 治疗组的角膜在溃疡形成面积，角膜混浊等级以角膜新生血管化程度方面均明 显好于对照组。①．角膜融解定量分析结果：烧伤后3d，A、B、C组角膜融 与中、高浓度组相比办存在统计学差异(P0．05)，而O．1％与O．5％浓度组之间 B组(1．344-0．4 比差异有统计学意义(P0．05)。②．角膜混浊定量分析结果：治疗组在烧伤后 角膜混浊评分低于对照组(P0．05)，其规律与角膜融解面积的变化曲线相～ 致，中高浓度组之间则无差异。③．角膜新生血管定量分析结果：治疗组在烧伤 义(PO．05)；此种差异性保持至第14d方逐渐减小。烧伤角膜HE染色检查 显示FK506治疗组基质中炎症细胞浸润的数量明显少于对照组，计数结果显示 lI 摘要 有统计学意义(PO．05)。免疫荧光提示治疗组中CD4阳性细胞的数量少于对 照组，通过光密度分析，低浓度治疗组为中等强度荧光，中高浓度治疗组为低 荧光，而对照组则表现为弥漫性强荧光。在整个角膜碱烧伤病理过程中，CD8+T 淋巴细胞的表达情况，给药组与对照组对比未见明显差异。 结论：他可莫司(FK506)局部使用可明显下调角膜碱烧伤后T淋巴细胞介导 的特异性免疫反应，同时也可间接减轻非特异性炎症反应，并且表现为浓度依 赖性。FK506局部干预后可阻止角膜碱烧伤后基质融解程度，抑制角膜新生血 管的生长，减轻角膜组织结构的破坏，改善角膜预后，从而为角膜碱烧伤急性 期的治疗提供了新的免疫治疗模式。 [关键词】：角膜；碱烧伤；FK506；免疫炎症反应，T淋巴细胞 III Abstract ABSTRACT theeffective concentrationofthe and about Objective：Research drug dosageregimen FK506 oncornealalkali eyedrops bums；evaluatetheinhibitionofimmuneand incornealalkali theeffectivenessof inflammatoryresponse bums，improve corneal microenvironmentand its mechanism． approach Methods：filter soakedNaOHsolutionwas onthe paper placed cornealtofonnmoderate cornealalkalibummodel．Than96wistarrats