一株产胶原酶海洋微生物发酵条件的研究.docVIP

基金项目：辽宁省教育厅A类项目（2008063）。 第一作者简介：白杨，男，1984年出生，硕士，。E-mail：。 通信作者：钱斯日古楞，男，1969年出生，副教授，，。通信地址：，E-mail：。 收稿日期：2010-09-16，修回日期：2010-10-25。 一株产胶原酶海洋微生物发酵条件的研究 白杨，钱斯日古楞，王红英 （大连工业大学生物工程学院，辽宁大连 116034） 摘要：于海洋污泥中筛选得到的Aeromonas sp.F3所产的胞外酶对胶原蛋白有水解作用，采用单因素试验法对Aeromonas sp.F3的发酵条件及培养基组分进行全面优化，提高该胶原酶生产菌的产酶效率。经优化验结果表明，该菌株最佳发酵条件为：培养时间24 h，温度40℃，初始pH为8，装瓶量80100 mL/250 mL；培养基组分为：葡萄糖3 g/L，酵母浸粉9 g/L，NaCl 5 g/L，MnSO4 10 mg/L。经优化验明显提升了该菌株的产酶能力。 关键词：胶原酶；发酵条件；优化；酶活 中图分类号：文献标志码： 论文编号：2010-2734 Fermentation Conditions of a Collagenase-Producing Marine Microorganism Bai Yang, Qian Siriguleng, Wang Hongying (School of Biological Engineering, Dalian Polytechnic University, Dalian Liaoning 116034) Abstract: Aeromonas sp.F3 screened from marine mud should secrete a protease to hydrolyze collagen. The fermentation of Aeromonas sp.F3 was investigated through single-factor test. The main factors included fermentation conditions and the medium. With single factor trial, the optimal culture condition was determined: 40℃ of fermentation temperature, pH8 and volume 80~100 mL/250 mL for 24 h. The optimal liquid medium was: 3 g/L glucose as carbon source, 9 g/L yeast extract powder as nitrogen source, 5 g/L NaCl as inorganic salt and 10 mg/L MnSO4 as metal ion. Under the optimum condition, the enzyme activity increased very observably. Key words: collagenase; fermentation conditions; optimization; enzyme activity 0 引言 国是世界渔业生产大国、水产品出口大国和主要远洋渔业国家，水产品总产量连续20年位居世界第，世界水产养殖总产量的70%来自中国。近年来仅鱿鱼年产量就达到12万以上。在鱿鱼的深加工中会产生15%~20%的内脏及表皮等废弃物[1]，不仅如此，在淡水鱼的加工中，鱼鳞和鱼皮也被作为废弃物扔掉。这些废弃物具有很高的营养价值，含有大量的粗胶原蛋白，如果能充分利用这些渔业下脚料来提取胶原蛋白，不仅能促进渔业的进一步发展产生巨大的经济效益，也能减少环境污染[2]。 胶原蛋白是由条肽链拧成的螺旋形蛋白质[3]，广泛存在于人体的皮肤、骨骼、肌腱和内脏等部位，具有极其重要的生理功能，并在医疗、、保健、食品等许多方面具有极其广泛的应用[-7]。胶原蛋白的提取有多种方法，其中酶法在提取效率及安全性上都有明显的优势[]。胶原酶，即胶原蛋白水解酶，在其适合条件下能特异地降解胶原蛋白的三螺旋结构，且不损坏其活性肽结构。具有的应用范围[]。许多土壤、皮毛、海水来源的微生物都能产生胶原酶[]，例如一些梭菌、弧菌和类菌体等。对验室提供的产胶原酶菌株Aeromonas sp.F3的培养条件及培养基组分进行优化设计，提高其胶原酶的单位产量。1 材料与方法 1.1 试验时间、地点 试验2009年9月2010年6月大连工业大学生物工程学院发酵工程验室。 1.2 材料 菌株Aeromonas sp.F3由验室提供，于海洋