小檗碱对HL-60细胞增殖、凋亡和VEGFR2表达的影响.pdfVIP

小檗碱对HL．60细胞增殖、凋亡及VEGFR2表达的影响 中文摘要 【目的】 本研究拟观察小檗碱(berberine)对体外培养的人早幼粒白血病细胞株 HL．60细胞的增殖、凋亡的影响，并初步探讨其与人血管内皮生长因子受体．2 (vascularendothelial groⅢh彘Ictorreceptor一2，VEGFR2)表达的影响。 【方法】 体外培养HL．60细胞株，取对数生长期的细胞用于实验研究。倒置显微镜 下观察小檗碱作用HL．60细胞后细胞形念的变化；采用CCK．8试剂盒检测不同 浓度小檗碱作用HL．60细胞不同时间点的细胞生长抑制率；用流式细胞术检测 的变化。 【结果】 h、24 h，细胞随着小檗碱浓度的增加，与对 96嵋／ml小檗碱作用HL-60细胞12 h、48 照组比较，细胞形态变化不明显；小檗碱作用细胞36 h，随着药物浓度的 增加，镜下可见细胞胞体逐渐变小，部分细胞碎裂、可见较多细胞碎片。药物浓 度越高，细胞密度越小，碎片越多。 (2)终浓度为6呜／ml、12嵋／ml、24pg／ml、48嵋／ml、96烬／ml小檗碱作用 HL．60细胞12h、24h，随着小檗碱浓度的增加，细胞抑制率变化不明显；药物 作用36h、48h，随着药物浓度的增加，抑制率逐渐增高。实验组与对照组相比 较，差异具有统计学意义(庐15．236，PO．01)。不同时间段组之间相互比较，差 异亦具有统计学意义(庐4．618，PO．05)。 (3)流式细胞术检测结果：终浓度为6pg／ml、12pg／ml、24pg／ml、48峙／ml、 h后，随着小檗碱浓度的增加，Gl期细胞百 96¨g／ml小檗碱作用HL-60细胞36 分比增加，S期细胞百分比减少，实验组与对照组相比较，差异具有统计学意义 加，实验组与对照组相比较，差异具有统计学意义(辟1473．964，尸O．01)。 HL．60细胞36 体，其细胞核明显固缩、凝聚和断裂，随着小檗碱浓度的增加，出现凋亡小体的 细胞明显增多。而对照组细胞核染色均匀。 ／ml、12鹇／ml、24嵋／ml、48 h 后，细胞VEGFR2mRNA及蛋白表达呈递减趋势，与对照组比较，差异具有统 计学意义(庐8．699，P0．Ol；产4．408，尸0．01)。 【结论】 (1) 小檗碱具有抑制HL．60细胞增殖、诱导其凋亡的作用。 (2) 小檗碱能降低HL．60细胞的vEGFR2表达。 【关键词】 小檗碱； HL．60细胞；VEGFl毪：细胞周期；细胞凋亡 2 onHL一60cells and Ef佗ctsofberberine apoptosis proliferation， the ofⅦGFR2 expression Abstract 【objectiVe】 thee虢ctofberberineonthe aIld To cycle，apoptosis inVestigate proliferation，cell whichtheHL．60cell