小白菊内酯诱导EB病毒阳性伯基特淋巴瘤细胞凋亡及深菌毒性机制研究.pdfVIP

摘要 [目的] EB病毒以潜伏感染形式寄存在EB病毒相关肿瘤细胞中，NF—kB起着关键性 作用。抑制NF—kB活性能够诱导朗病毒进入溶菌循环，并对肿瘤细胞产生溶菌 本课题旨在探讨PN对髓病毒阳性伯基特淋巴瘤的抑制作用，以及对肿瘤细 胞中EB病毒溶菌循环的诱导作用和溶菌毒性，并对其机制作初步探讨，进一步 研究PN以及联合抗病毒药物治疗EB病毒阳性伯基特淋巴瘤的可行性和临床应 用价值。 [方法] 通过描绘细胞生长曲线、MTT的方法观察PN对脚i细胞的生长和活性 抑制情况；锄exinV-PI和DAPI染色观察PN对细胞的促凋亡作用；流式细胞 分析PN作用前后胞浆、胞核中NF．kB量的变化；MTT法分析PN与更昔洛韦 合用对Raii细胞毒作用。 统计学处理：数据统计分析采用SPSS13．O统计软件包进行处理，实验所得 法分析，pO．05为差异具有统计学意义。 [结果] 12um01／LPN处理Raji细胞后，其增殖能力显著抑制，48小时抑制率分别为 2．PN诱导Raji细胞凋亡。DAPI染色显示PN处理组凋亡细胞比例明显高于对 umol／L、4 照组，锄exmV-PI标记流式细胞仪检测结果．0 umol／L、6umol几 PN作用Raji细胞48小时后凋亡细胞数分别为：3％±2％、26％±2％、37％±3％． Ⅱ (流式细胞术分析) 3．PN导致Raji细胞周期阻滞。流式细胞仪检测细胞周期显示PN处理组G0／Gl 期细胞数增多。 (流式细胞术分析) 4．PN诱导Raji细胞凋亡通过线粒体途径。(Western岫lot分析) 5．PN能够诱导Raji细胞进入溶菌循环。(RT—PCR法分析) 与空白对照比NF—kB(p65)蛋白表达量在细胞核中明显减少，并且ELISE结果 7．PN与更昔洛韦联合能够明显增强其对Raji细胞的毒作用。(MTT分析) 结论：小白菊内酯对朗病毒相关伯基特淋巴瘤细胞具有细胞毒性及溶菌毒性， 联合抗病毒药物是治疗EB病毒相关伯基特淋巴瘤的一种新方法。 关键词：小白菊内酯 朗病毒溶菌复制 NF—KB 伯基特淋巴瘤 m Abstract 【objec廿ve】 in cellsis re嘶ctedtot11e nⅡnor latelltfom Epstein-Ba盯(EBV)infe“on generally Viral to of infection．111eswitch舶mlat饥t infectioninducet11Inorcells l如c may death．An nuclear faCtor to import觚t factor，nuclear0盯)-l(B，ismought play觚 roleinEBV essential inf-ection；B诚tt beeIl tobe l如c lyInphoma(BL)haSr印orted associatedwim facttllatEBVis s仃D姆y Epstein-Barr访ms(EBⅥillfection．11le incallcersbut