小细胞肺癌血浆差异蛋白的双向电泳-质谱探析.pdfVIP

l llIII }1111LIilllIII II II lll Y1900427 目 录 —1_|文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………3 英文缩写………………………………………………………………………5 研究论文小细胞肺癌血浆差异蛋白的双向电泳一质谱分析 前言………………………………………………………………………6月IJ舌……………………………………………………………………… 材料与方法………………………………………………………………7 结果……………………………………………………………………19 附图……………………………………………………………………22 附表……………………………………………………………………28 讨论……………………………………………………………………28 结论……………………………………………………………………33 参考义献………………………………………………………………33 综述双向凝胶j也泳…质谱技术，}￡在恶。H叫巾9渐忠青．向．浆标址物分析，{，的肫 用………………………………………………………………………38 致谢…………………………………………………………………………．．48 个人简历……………………………………………………………………．．49 中文摘要 小细胞肺癌血浆差异蛋白双向凝胶电泳一质谱分析 摘 要 i=1的：本研究应用双向荧光芹芹凝胶IU泳(two．dimensional difference gelelectrophoresis简称2一D chromat masss ography 癌患者与健康对照者血浆蛋白质组表达的差异；寻找并鉴定与小细胞肺癌 癌变相关的蛋白。 方法：以小细胞肺癌患者及健康者血浆为研究对象，应片jExtract RemovalKit，2D Kit试剂盒，对血浆样品进行预处 Albumin／IgG Clean—up 理；采用双向荧光差异凝胶电泳实验方法，对其各组样品进行荧光标记后， 行一向固相梯度等电聚焦电泳(Isoelectric SDS聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳(Polyaerylamidegel 质组图；采用DeCyder6．5软件进行分析，找到典几有统计。丫：意义的芹芹 蛋白点；应用液相色谱质谱(LC—MS／MS)获得肽质量指纹图；通过搜索 NCBIpro蛋白质数据库，鉴定与肿瘤相关蛋白质。 结果： 1采川优化119舣向荧光筹异凝皎Ill泳披术获识r厂币复，阿：良!c“}，』小细 胞肿痛忠栉和健康崭’的血浆蛋白质2D 个蛋白点行质谱鉴定，其中在小细胞肺癌中上调的蛋白点有16个(334、 970、971)，4／13、465可找到十日l儿fldV,J蛋白：卜．训蛋白li仃25个(178、 均为未知蛋白质。 zone 中文摘要 proteimComplement chain C9， gamma一3 的蛋白质，由于双向凝胶电泳的分辨力，或质谱分析敏感性的限制，以及 部分蛋白质可能是未发现的新蛋白，有待进一步研究。 结论： 1应用双向荧光差异凝胶电泳联合液相色谱质谱技术成功的筛选并 鉴定出了小细胞肺癌患者和健康人血浆差异蛋白质；通过研究一些急性期 有待于进一步研究探讨。 22D．DIGE改善了传