小白菊内酯对上皮性卵巢癌细胞和其铂耐药细胞的作用研究.pdfVIP

中文摘要 小白菊内酯对上皮性卵巢癌细胞及其铂耐药细胞的作用研究 摘 要 目的：上皮性卵巢癌是一种高度恶性的妇科肿瘤，由于缺乏早期诊断 方法，其五年生存率徘徊在30％左右。目前卵巢癌的治疗方法主要为彻底 的肿瘤细胞减灭术和以铂类药物为主的化疗。但随着化疗时间的延长，癌 细胞对铂类药物产生的耐药性及铂类药物尤其是顺铂的长期应用造成的 肾毒性，也限制了铂类药物的应用，这使手术后治疗和化疗效果处于平台 期，总的生存率没有明显提高，寻找有效而毒性小的抗癌药物成为临床治 疗的迫切要求，这对降低患者的死亡率、提高患者的生存质量具有重要的 临床意义。 一种倍半萜内酯化合物，也是野甘菊的主要活性成分之一，用于治疗发热， 偏头疼和关节炎有着悠久的历史。已有研究表明小白菊内酯是一种有效的 核转录因子．KB(Nuclear transicription 特定作用于IKb激酶复合体，抑制NF．r33的活性。近年来的研究证实，小 白菊内酯能在多种人类肿瘤细胞株中通过诱导凋亡引起细胞死亡，比如结 肠癌、胰腺癌、肝癌和多发性骨髓瘤等，此外，小白菊内酯还能增强肿瘤 细胞对抗肿瘤药物的敏感性，但目前小白菊内酯对卵巢癌作用的研究尚未 见报道。 本实验通过体外培养卵巢上皮性癌细胞株和卵巢癌铂耐药细胞株，观 察小白菊内酯对上皮性卵巢癌细胞和卵巢癌耐药细胞增殖的影响；比较小 性癌细胞株和铂耐药细胞株的关系及小白菊内酯在卵巢癌细胞株中对其 的作用；同时用小白菊内酯和顺铂联合作用于卵巢癌耐药细胞株，探讨小 白菊内酯是否能增强卵巢癌耐药细胞株对顺铂的敏感性，为卵巢癌的治疗 提供新的思路。 方法：将人卵巢浆液性囊腺癌细胞株SKOV-3及其铂耐药细胞株 RPMll640培养基中常规培养，待两种细胞进入对数生长期后用于实验。 中文摘要 1光镜观察：将不同浓度的小白菊内酯分别作用于SKOV-3和 SKOV-3／DDP细胞株，在倒置显微镜下定时观察细胞生长的情况。 2 种细胞株于不同时间(12、24、36、48h)，以PAR 0umol／L为对照组，由 偶氮唑蓝(MTT)法检测PAR对细胞的生长抑制作用。 胰酶消化制作细胞涂片，待细胞贴壁后使细胞同步化24h，然后加25 光度值，比较各组NF．r．B的表达情况。 iodide，PI)标记的流式细胞术检测 4流式细胞术：采用碘化丙啶(propidium 小白菊内酯是否能增强SKOV-3／DDP细胞对顺铂的敏感性。实验分组如 SKOV-3／DDP细胞@eAR组：89mol／L ③DDP组：2．5 gg／ml PAR和2．5 89mol／L 1 5应用SPSS3．0统计软件进行数据分析。 结果l l倒置显微镜下可见，不同浓度的小白菊内酯作用于SKOV-3和 密集度明显减少，其增殖活性明显降低，细胞形状逐渐由梭形变为圆形， 细胞膜也由完整逐渐变为皱缩，圆形细胞逐渐增多。细胞体积普遍变小， 胞质浓缩，细胞膜不完整，形态呈不规则，贴壁能力明显减弱，最后漂浮。 2 细胞后，随着PAR浓度的增加和作用时间的延长，两种细胞的增殖活性 与对照组相比都有明显的减弱，差异均有统计学意义(均p0．05)，最大 浓度小白菊内酯组与DMSO组相比，增殖活性明显减弱，差异有统计学 意义(pO．05)。 3细胞免疫组化结果显示：SK0v-3细胞在经过小白菊内酯处理前后比 中文摘要 在经过小白菊内酯处理前后比较，分析软件测得小白菊内酯处理前的吸光 光度值(0．41 (0．53 134-0．035)，差异有统计学意义(pO．05)。 4PI标记的流式细胞术检测结果显示：小白菊内酯联合顺铂能抑制 SKOV-3／DDP细胞凋亡，阻滞细胞周期在S期 (7．694-1．34)，差异有统计学意义(pO．05)。 (19士1．32)。 结论： l小白菊内酯能抑制SKOV．3细胞的增殖，并具有时间．浓度依赖关系。 同一浓度的小白菊内酯