培养基中酵母数量的动态变化.pptVIP

培养液中酵母菌数量的动态变化 （必修3 P68） 惠州市实验中学　祝运琴 酵母菌出芽生殖 酵母菌的新陈代谢类型：兼性厌氧型 无氧呼吸 C6H12O6＋6H2O＋6O2 6CO2＋12H2O＋能量 酶 有氧呼吸 C6H12O6 　2C2H5OH＋2CO2＋能量 酶 一、实验目的 1．通过探究培养液中酵母菌种群数量的变化，尝试建构种群增长的数学模型。 2．用数学模型解释种群数量的变化。 3．学会使用血球计数板进行计数。 二、实验原理 1．在含糖的液体培养基（培养液）中酵母菌繁殖很快，迅速形成一个封闭容器内的酵母菌种群，通过细胞计数可以测定封闭容器内的酵母菌种群随时间而发生的数量变化。 2．养分、空间、温度与有毒排泄物等是影响种群数量持续增长的限制因素。 三、方法步骤 探究实验的一般步骤：提出问题→作出假设→讨论探究思路→制定计划→实施计划→按计划中确定的工作流程认真操作，做好实验记录→分析结果，得出结论→将记录的数据用曲线图表示出来。 注意： 1、提出的问题可以是：培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？也可以提出其他的探究问题，例如，在不同温度（以及通氧、通CO2等）条件下酵母菌种群数量增长的情况如何？不同培养液（如加糖与不加糖）中酵母菌种群数量增长的情况如何？等等。 2、本实验时间较长（7天），因此事前一定要做好周密的计划，定程序、定时间、定人员。 3、酵母菌计数方法：抽样检测法。 先将盖玻片（专用的厚玻片 ）放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入。多余培养液用滤纸吸去。稍待片刻，待细菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台的中央，计数一个小方格内的酵母菌数量，再以此为根据，估算试管中的酵母菌总数。 4、从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几次。 血球计数板的构造 是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面，刻有一个方格网。 计数室通常有两种规格。一种是大方格内分为16中格，每一中格又分为25小格；另一种是大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一种构造；它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由16×25＝25×16＝400个小方格组成，见右图。 纵切面图 正面体 方格网上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，供微生物计数用。这一大方格的长与宽各为1mm，深度为0.1mm，其体积为0.1mm3。 每个大方格中有16个中格 每个中格中有25个小格 计数室 方格网放大 每个中格放大 四、方案设计过程 （一）提出问题： 培养一种酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？ （二）作出假设： 　　　环境中的资源与空间有限的条件下，酵母菌种群的数量呈S型增长。 （三）设计实验 ①全班同学分成甲、乙、丙等若干实验组。 ②分别用等量培养液，在相同适宜环境中培养等量酵母菌。 ③每天用血球计数板，采用抽样检测的方法计数一个小方格内的酵母菌数量并作记录，连续7天。 ④7天后，各组向全班汇报本小组7天的数据，算出每一天数据的全班平均值，根据平均值画出酵母菌种群数量的增长曲线。 四、方案设计过程 （四）实验过程 1、材料用具： 探究所需要的菌种与无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血球计数板（2mm×2mm×0．1mm方格）、滴管、显微镜等。 2、方法步骤和记录： （1）取相同试管若干支，分别加入5ml肉汤培养液，塞上棉塞。 （2）用高压锅进行高压蒸汽灭菌后冷却至室温，标记甲、乙、丙等 （3）将酵母菌母液分别加入试管各5ml，摇匀后用血球计数板计数起始酵母液个数，做好记录。 （4）将各试管送进恒温箱，25℃下培养7天。 3、现象观察 每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察7天。 培养液中酵母菌种群数量7天中的变化记录表 四、方案设计过程 (2．5×104个) (天) 组别 起始 1 2 3 4 5 6 7 甲 乙 丙 … … … … … … … … … 平均 菌数 时间 （五）实验结论 1、根据表格平均值，以时间为横坐标，酵母菌的数量为纵坐标，绘制出培养液中酵母菌种群数量7天中的变化曲线（种群增长曲线）。 2、培养液酵母菌种群数量随时间呈S型增长变化。 四、方案设计过程 五、实验讨论 1．怎样进行酵母菌的计数？ 1mL＝1×103　mm3 血球计数板一个小方格的体积为 2mm×2mm×0.1mm＝0.4mm3 若一个小方格范围内的酵母菌数为a，则10mL培养液中酵母菌总数为： a× ×10＝2.5a×104（个／10mL） 若一个小方格内酵母菌过多