稀土镧化合物抗宫颈癌效应的体外探究.pdfVIP

摘要 摘要 目的： 探讨稀土镧化合物对体外培养的人宫颈癌细胞增殖，迁移和侵袭能力的影 响，寻找新的有效拮抗富颈癌的药物，为稀土运用于宫颈癌的治疗提供实验依 据。 方法： 1．宫颈癌细胞株HeLa细胞经培养、传代后分为两组，即实验组(培养基中 含有5、50、100}lmol／L的氯化镧)和对照组(培养基中不含氯化镧)。 2．倒置显微镜下观察两组细胞的生长情况，激光共聚焦显微镜观察两组细 胞的形态变化。 细胞生长的抑制作用。 4．以双标染色，流式细胞术分析氯化镧对Hela细胞凋亡的影响。 5．以Transwelld、室法观察氯化镧对宫颈癌细胞迁移能力的影响。 6．细胞侵袭实验观察氯化镧对宫颈癌细胞侵袭能力的影响。 7．RT．PCR法分析氯化镧对宫颈癌Hela细胞中增殖、抗凋亡、迁移和侵袭相 响。 8．以细胞免疫荧光法检测并在激光共聚焦显微镜下观察氯化镧对宫颈癌 Hela细胞qbcyelinDl蛋白的表达的影响。 结果： 1．倒置显微镜下观察：实验组细胞随着氯化镧浓度的增高，细胞密度逐渐 降低，细胞质内颗粒逐渐增多，颜色加深，细胞间隙增大，少量细胞变圆漂浮， 脱落细胞也逐渐增多；而对照组细胞贴壁生长密集，形态清晰，胞质饱满，相 邻细胞生长融合成片。激光共聚焦显微镜观察：实验组细胞核染色质浓聚、边 集，核体积变小，随着氯化镧浓度的增高，核染色质崩解，核膜破裂，核碎裂， 直至细胞核完全碎裂；而对照组细胞核饱满，核膜完整。 II 摘要 78％，均显著高于对照组(尸0．05)。 3．经Annexin V—FITC／PI双标染色分析，各实验组细胞凋亡率(％)分别为 ％，差异有统计学意义(P0．01)。 于对照组的(41．25-4-5．38)个，差异有统计学意义(P0．01)。 5．细胞侵袭能力检测结果表明，经氯化镧分别作用24h后，穿膜细胞数分 个，差异有统计学意义(P0．01)。 mRNA的表达随 6．RT．PCR结果表明实验组细胞中cyclinDl、A20及MMP．9 氯化镧浓度(5、50、1009mol／L)的增高逐渐减弱。 7．激光共聚焦显微镜观察结果显示随着氯化镧浓度的增高，cyclinDl的蛋 白表达逐渐降低。 结论： 氯化镧通过下调人宫颈癌细胞中增殖、抗凋亡、迁移和侵袭相关基因 并诱导其凋亡。 关键词：宫颈癌；氯化镧；细胞增殖：凋亡；迁移；侵袭 III Abstract -————————————————————————————————————————————————————一 ABSTRACT theeffectsofthelanthanum on Toinvestigate compounds obiective cervicalcancercell andinvasionofhuman activity proliferation，apoptosis，migration to cancerand to anewanti—cervical