蛋白质及荧光探针的作用及其分析应用的分析研究.pdfVIP

摘要 蛋白质是生命最重要的物质基础之一，其定量测量是化学、生物化学、医学等研究 领域的重要课题。近年来荧光探针染料与蛋白质结合后的荧光特性、动力学特征和电化 学特征等受到关注，并以此为基础建立分析方法。荧光探针技术最大的特点是具有高度 的灵敏性和极宽的动态响应范围，进一步建立高灵敏度、低检测限的荧光探针定量测定 蛋白质的方法具有重要意义。 本论文主要包括以下两个方面的内容： 1概述蛋白质的化学基础，综述了蛋白质定量分析的一些主要方法及其在生物化学、药 学、食品和临床医学等方面的应用，引用文献112篇； 2寻找探索新的性能优良的荧光探针 质中能与血清蛋白形成复合物，蛋白质可使荧光桃红B的荧光强度减弱，并且其减弱 程度对人血清白蛋白(HSA)的线性范围是0．02·O．24 mg／L，检测限为8．3ttg／L，对0．1 方法准确可靠。 (2)二聚体荧光染料探针：研究发现，中性介质中钙黄绿素在表面活性剂CTMAB 的作用下形成二聚体，体系荧光强度减弱，而加入蛋白质后体系荧光强度增强，且增强 程度与体系中的蛋白质的量呈线性关系，此方法对HSA的线性范围为O．4～8mg／L，检 光素(SF)二聚体可作为测定人血清总蛋白的荧光探针，方法的线性范围为O．3～6mg／L， 检出限为6999／L，对3mg／L的HSA的11次平行测定的标准偏差为0．96％。中性介质 中，水杨基荧光酮二聚体可作为测定人血清总蛋白，方法的线性范围为O．8～12mg／L， 检出限为80pg／L，对含量为2mg／LHSA的11次测定的相对标准偏差为1．1％。将以上 方法直接应用于人血清的测定，与经典的考马斯亮蓝法测定的结果相吻合，结果令人满 意。 3深入开展蛋白质与染料探针相互作用机理研究 研究了染料与蛋白质以及染料、表面活性剂和蛋白质的荧光光谱和紫外光谱，对其 反应机理进行深入的研究。深入开展蛋白质与燃料探针的相互作用的理论研究不仅对于 改进蛋白质分析方法有实际意义，而且有助于阐明生物大分子与小分子配体相互作用的 化学本质。因而在生命科学中有重要意义。 关键词：蛋白质，荧光探针，染料二聚体，表面活性剂 II Abstract the determinationof Proteinisoneofthemost substancesoflife．Thus important quantitative protein isavital inthefieldsof and field．Inrecent chemistry,biochemistry years，the subject iatrology fluorescence characteristicand characteristicofit hasbeen characteristic，kinetics electrochemistry researchedafterfluorescencebindto basedon new methods dyeprobe protein．Andthis，someanalytical weremade．Thedistinctcharactersoffluorescenceisit and itis linearity．So probehighsemitivitygood tofindnewflu