棉花Rac蛋白基因GhRacA的功能分析.pdfVIP

西南大学硕十学f}r论文 摘要 生物化学与分子生物学硕士研究生彭{韦 指导教师肖月华副教授 摘 要 棉花作为世界上最重要的天然纤维类经济作物。我国的棉花产量和消费都居世界前列， 棉花产业对国民经济影响巨大。棉花的遗传育种在近10年没有取得大的突破，植物基因工程 的兴起为棉花育种的突破提供了新的思路和广阔的操作空间。但寻找能影响棉花纤维起始和 伸长的基因并得到相应的转基因植株难度不小，因而转基因棉花的纤维改良目前还未取得重 大突破。 Rac蛋白是小G蛋白家族的成员，作为细胞膜上重要的信号开关，被认为是植物信号传 导网络的核心。它们和多种效应物相互作用，调节肌动蛋白动力学、活性氧的生成、细胞激 素反应和细胞极性建成等。前人研究表明，Rac蛋白蛋白参与了棉花纤维的次生壁合成，在 H202介导的反应中起到了重要的作用。 为研究Rac蛋白在棉花纤维发育中的功能，本实验室前期从棉花纤维中克隆了Rac同源 在伸长期纤维中优势表达。本论文构建了GhRacA基因RNA干扰载体，并用超星表达和反义 抑制载体进行棉花遗传转化，进一步观察了GhRacA转基因植株的表型变化。 主要结果如下： 1-构建了组成性表达的GhRacA基因的RNA干扰载体。 2．通过农杆菌遗传转化得到355：：GhRacA的转基因棉花3个独立株系共4株笛， 反义抑制转基因棉花2个独立株系共3株苗， 平表达，而GhRacARNAi转基因棉花中GhRacA基因的表达水平降低明显。 3．过氧化氢的组织染色结果表明超餐表达GFP：：GhRacA基因能促进H202的产生。 4．棉花纤维的检测表明表达GhRacA的转基因棉花的纤维比正常纤维的长度要短，但反 义抑制GhRacA的转基因棉花的纤维长度没有明显变化。 5．体外胚珠培养表明超量表达GFP：：GhRacA的转基因棉花的纤维比反义抑制和对照的 纤维显著缩短。 西南大学硕士学伊论文 摘要 6．石蜡切片观察胚珠表面的纤维起始和早期伸长情况，结果发现纤维的起始无明显差 异，但超量表达G即：：GhRocA的转基因棉花纤维的早期伸长受到明显的抑制。 综上，超量表达GhRacA基因可能抑制纤维的伸长，说明该基因在棉花纤维伸长中有着 重要的功能。论文为最终阐明GhRacA基因影响棉花纤维生长发育的分子机理奠定了基础。 关键词：棉花纤维G蛋白Rac蛋白GhRacA基因基因工程 一II— 两南大学硕+学伊论文 Abstract Abstract isthe in hasbeen Cotton most fiber the achievement importantcrop world．Althoughgreat is to thefiber and traditional obtained,it verydifficultyimprove produ甜“tyqual时by breeding． Gene a new andbroad tocotton its engineeringprovidedsh—ategy peTSpC枷Ve8 breeding，but wasblockedlackofcloned toinitiationand cotton