亚叶酸钙体内外样品分析--_--RP-HPLC方法学的分析研究及其应用.pdf

第三部分血浆中亚叶酸钙的固相萃取一反相离子对HPLC分析方法 学研究一 本丈建立的固相萃取法，包括固相萃取柱(Sep—pak柱)的活化、 加样、杂质洗涤、亚叶酸钙的洗脱与浓缩、Sep—pak柱的再生等步骤。 (具有设备简单、操作简便、亚叶酸钙提取率高、试验结果重现性好、 ● Sep—pak柱可重复使用20多次、试验成本低等优点。 色谱条件：采用Lichrosorb Cl8色谱柱(150mmx4．6mm I．D．，5p,m)， 基磷酸铵2mmol—L～，用三乙胺调表观pH至5．5。流速为1．0ml—min一， 柱温为常温，检测波长286nm。 在上述色谱条件下，亚叶酸钙的保留时间6．3min，对氨基苯乙酮 (内标)的保留时间7．5min，不受血浆中内源性杂质及亚叶酸钙代谢 产物5一甲基四氢叶酸的干扰。本法的检测限为8ng，最低检5F,4浓度 C 内、天间RSD分别为2．81％～6．05％、2．44％一5．29％。3 第四部分亚叶酸钙片剂、胶囊在人体内的血药浓度测定及药动学参 数。 选用12名健康志愿者，将3种亚叶酸钙制剂(国产片剂、胶囊 和进口片剂)经自身三交叉试验后，测定血浆中亚叶酸钙浓度，用 3P97软件计算主要药动学参数和相对生物利用度，并进行统计学分 析，i ／ C (试验片、胶囊和参比片剂单剂量po75mg后易吸收，o．5h后血浆 中药j物浓度即可达100ng／ml以上。亚叶酸钙在健康人体内动力学符 合两室模型，但许多参数存在明显个体差异。T。。分别为(2．46±o．33)、 f6222．20±1283．69)、(6739．87±1717．431h·gg·L～。试验片、胶囊相对 13．071％。经过方差分析、单双侧t检验和90％置信区间分析，结果 表明亚叶酸钙试验片、胶囊分别与参比片剂相比，均为生物等效。、} 1 L C 、 关键词：亚叶酸钙i反相高效液相色谱法；稳定·性试验；固相萃取于 药物动力学}相对生物并llift度。 分类号：R914：17。Eq，1 月IJ 吾 亚叶酸钙(calciumfolinate)片剂和胶裘是国内研制的四类新药， 属于抗贫血类药物，其化学名为N．[4．[(2一氨基一5一甲酰基一l，4，5，6，7，8一 六氢．4一氧代．6一蝶啶基)甲基】氨基】苯甲酰基一L一谷氨酸钙盐的五水合 物，结构式如下： C H H M¨ H2 H N L N H 5H，0 CH0 N O 1