生物化学-4(酶-2).ppt

概念：存在于同一种属或不同种属，同一个体的不同组织或同一组织、同一细胞，具有不同分子形式但却能催化相同的化学反应的一组酶，称之为同工酶（isoenzyme）。乳酸脱氢酶是研究的最多的同工酶。 生物学功能：?遗传的标志 ?和个体发育及组织分化密切相关 ?适应不同组织或不同细胞器在代谢上的不同需要 同工酶的存在是生物界的普遍现象。同工酶可以用电泳和组织化学相结合的方法进行鉴定。 现在已发现有几百种同工酶，如6-磷酸葡萄糖脱氢酶、乳酸脱氢酶、酸性和碱性磷酸酶、谷丙转氨酶和谷草转氨酸、肌酸磷酸激酶、核糖核酸酶、过氧化酶和胆碱酯酶等。 研究较多的是人和动物的乳酸脱氢酶(LDH)，它有5种同工酶： 分子量在13万～15万，都由4个亚基组成。LDH的亚基可分为型：骨骼肌型(M型)和心肌型(H型)。M、H亚基的氨基酸组成有差别，可用电泳分离。 LDH同工酶的两种不同肽链是受不同基因控制产生的。不同类型的LDH同工酶在不同组织中的比例不同，心肌中以LDH1及LDH2较为丰富，骨骼肌及肝中含LDH5及LDH4较多。这都与它们的生理功能关。 同工酶的研究具广泛的意义和应用： 研究基因突变，是生物遗传学上的重要信号。 从同工酶的变化上可反映出在发育过程中基因表达顺序。 在代谢过程中起重要的调节控制作用。 同工酶分析法在植物育种上用于优势杂交组合的预测。 病理学、防疫学研究。 生物进化、生物地理分布、群体遗传的研究工具。 诱导酶（induced enzyme ） 诱导酶是在一定诱导物诱导下，编码某种酶蛋白的基因才能表达而合成的酶。 如半乳糖苷酶、硝酸还原酶分别受其底物半乳糖和硝酸盐的诱导。 酶活力（酶活性，enzyme activity）是指酶催化一定化学反应的能力。 酶量很难用酶的“量”（质量、体积、浓度）来表示。常用酶活力来表示酶量，即酶催化某一特定化学反应的能力。 酶促反应速度(E action rate)可用单位时间、单位体积中底物的减少或产物的增加表示。如用化学滴定、比色、比旋光度、测定紫外吸收、电化学法、气体测定等。由于产物是从无到有，因此一般测定产物的增加。 蛋白质分离纯化的方法原则上都适用于酶的分离纯化。比蛋白质分离纯化更有利的是，在酶的分离纯化过程中可以通过监测酶的总活力和比活力来跟踪酶的动向，提高酶的回收率；同时也可对设计的方法是否高效合理进行评价，有利于方法的改进完善。 3.7.1 酶的应用 酶不仅在生命活动中有极为重要的作用，而且在工农业、医药以及科学研究中也发挥了巨大作用。 由于酶的催化效率高，专一性强，不发生副反应；作用条件温和；无毒性等优点，在工业中有着广阔的发展前景。 目前国际市场上，商品酶制剂品种约有六七百种，使用范围极其广泛，在工业上有用的酶有数十种。 蛋白酶用于皮革工业的脱毛和软化，蚕丝脱胶、肉类嫩化、酒类澄清或加入洗涤剂中以洗涤血渍和蛋白污物(加酶洗衣粉)。 脂肪酶可用于食品增香、羊毛洗涤；葡萄糖异构酶可用来制造果糖浆；葡萄糖氧化酶可用来除去罐头中残余的氧。 淀粉酶和纤维素酶也可用来处理饲料，以增加饲料转化率；利用微生物体内的酶可加工青贮饲料和糖化饲料等。 临床医学上常常通过测定血液或其它体液中酶的活性，来诊断某些疾病和了解病情的发展。 酶还常常用于治疗某些疾病。如胃蛋白酶、胰酶制剂可增进消化能力。L-天冬酰胺酶可用来治疗白血病。胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶可用于外科化脓性创口的净化以及胸腔或腹腔间浆膜粘连的治疗。 科研中很多酶是重要的工具酶，如DNA聚合酶、限制性内切酶、修饰酶和连接酶等。 3.7.2 酶工程的概念及研究内容 酶工程(enzymeenginering)是根据酶的生物催化性能，使其在工农业、医学及其它方面发挥作用的一门应用技术。 酶工程是酶学基本原理与化学工程技术及DNA重组技术有机结合的产物。它还包括酶的生产、分离和纯化。 根据研究问题和解决问题的手段不同将酶工程分为化学酶工程和生物酶工程。 3.7.2.2 生物酶工程 生物酶工程是从基因水平改造或设计新酶。 ①用DNA重组技术（基因工程）大量生产酶； ②对酶基因进行修饰，生产遗传修饰酶； ③设计新的酶基因，合成性能稳定，催化效率更高的非天然酶。 大多数维生素(特别是B族维生素)是组成许多酶的辅酶或辅基的成分，或其本身就是辅酶或辅基参与体内代谢过程。 通常一种酶蛋白只能与一种辅酶结合，成为一种特异的酶，但一种辅酶可与不同的酶蛋白结合构成多种特异性酶。 酶蛋白在酶促反应中主要起识别底物的作用，酶促反应的特异性、高效率以及酶对一些理化因素的不稳定性均决定于酶蛋白部分。辅酶或辅基在酶反