EB病毒BARF1基因表达对胃癌细胞株SGC7910生物学行为影响.docVIP

EB病毒BARF1基因表达对胃癌细胞株SGC7910生物学行为影响 　 作者：李友琼， 张雪怡， 曾健 陈巧林 李良菊， 成静， 訾瑞峰， 周天戟 【摘要】 目的： 了解EB病毒BARF1基因表达对胃癌细胞生物学行为的影响。方法： 构建pSG5/BARF1真核表达载体，转染到EB病毒阴性的胃癌细胞系SGC7901，经RTPCR鉴定，获得BARF1稳定表达的细胞克隆。以pSG5空载体转染细胞为对照，进行细胞凋亡诱导实验、细胞增殖实验、软琼脂集落形成实验和细胞迁移实验。结果： 与对照组相比，BARF1表达细胞组经抗癌药顺铂诱导后的细胞凋亡率显著降低（Plt;0.01），增殖速度显著加快（Plt;0.01），软琼脂集落形成率显著提高（Plt;0.05），细胞迁移能力显著增强（Plt;0.05）。结论： BARF1基因能够全面增强胃癌细胞的肿瘤原性，可能在EB病毒相关胃癌发生与演化的整个过程中起重要作用。 【关键词】 EB病毒； BARF1； 胃癌细胞； 细胞生物学行为 ［Abstract］ Objective: To investigate the oncogenic functions of EBVencoded BARF1 gene in gastric epithelial cells.Methods： A pSG5/BARF1 expression vector was constructed and transfected into an EBV negative and moderatelydifferentiated gastric cancer cell line SGC7901.The stably transfected cell clones were generated by limiting dilution and G418 screening, and BARF1 expression was confirmed by RTPCR.The biological behavior analysis were conducted including cell survive curve drawing and apoptosis observation after Hoechst33342 staining induced by anticancer drug diamminedichloroplatinum(DDP), cell growth curve drawing, softagar colony formation assay, as well as cell migration test under the control of vacant pSG5 vector transfected clones. Results： BARF1 expression in gastric cancer cells led to more resistant to apoptosis induced by DDP, faster proliferation, higher colony formation rate in soft agar, and stronger migration capability. Conclusion： BARF1 gene had all around oncogenic ability in gastric epithelial cells and may play an important role in the whole process of occurring and promoting EBVassociated gastric carcinoma. ［Key words］ EpsteinBarr virus; BARF1; gastric cancer; cell biological behavior EB病毒（EpsteinBarr virus, EBV）属于人γ疱疹病毒，与多种恶性肿瘤相关，如Burkitt 淋巴瘤（BL）、Hodokin病、鼻咽癌以及胃癌等。约2%～16%的胃腺癌组织中可检测到EB病毒潜伏感染所表达的EB病毒编码的小RNA（EBERs），称为EB病毒相关胃癌（EBVaGC）［1］。BARF1是EB病毒编码的癌基因，约90％病毒相关胃癌组织中可检测到BARF1蛋白［2, 3］，但其在病毒相关胃癌发生中的作用尚不十分清楚。我们采用BARF1真核表达载体转染的方法，建立BARF1稳定表达的胃癌细胞系，全面探讨BARF1基因表达对胃癌细胞生物学行为的影响，从而初步了解其在EB病毒相关胃癌细胞中的