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FHIT基因及肿瘤 　【关键词】 FHIT 　　摘要：结合关于FHIT基因分子生物学的新发现，对FHIT基因的结构、功能及与肿瘤的关系进行了综述。 　　关键词：FHIT基因；肿瘤 　　自从1996年Ohta［1］等利用外显子捕获法发现了定位在3p14.2的FHIT基因以来,经过几年的研究,认为FHIT基因是一个重要的抑癌基因并积累了一些证据。在进一步认清FHIT基因本质的基础上,本研究将结合一些关于FHIT基因分子生物学的新近发现,对FHIT基因的结构、功能及其与肿瘤的关系综述如下。 　　1 FHIT基因的发现及结构 　　自1979年从一个意大利的早发、双侧、多灶的肾透明细胞癌家系中观察到有染色体易位t（3;8）（p14.2;q24）以后［2］。多种研究发现在不同肿瘤组织中3号染色体短臂（3p）缺失现象频发，1996年Ohta［1］等利用定位克隆技术及外显子捕获法在染色体3p14.2区域内找到一种新的基因。此基因编码的蛋白质属于三氨酸家族,而且此基因易于断裂，故得名FHIT基因(fragile histidine triad gene ,即脆性组氨酸三联体基因)。FHIT基因在染色体上占据1Mb大小的位置，覆盖FRA3B脆性位点、肾细胞癌相关性断裂点t(3;8) 、抑癌基因γ蛋白质酪氨酸磷酸酶基因(proteintyrosine phosphataseγgene,PTPRG)的5′末端及HPV16整合位点，并含有编码组氨酸三联体(HIT) 的功能［3］。FHIT基因cDNA长1095bp，由10个外显子组成，分布在总长度为1Mb基因座上；其5′端含一段长约350bp的非编码区,随后为外显子5~9组成的长约500bp编码147个氨基酸的开放性阅读框架(openreadingframe,ORF)，3′端有多聚腺苷酸共有序列(polyAconsensussequence)和一个polyA尾；三个起始外显子1~3位于t(3;8)断裂着丝粒端前方，外显子5含有蛋氨酸起始密码,HPV16整合在外显子5′着丝粒侧；外显子6含有一个ORF内蛋氨酸密码，在外显子5缺失情况下可用其翻译出不完全的FHIT蛋白；外显子8含有编码组氨酸三联体(HIT)的核心单元［1］。FRA3B位于FHIT基因内含子4与5之间，在FHIT基因编码的第一个外显子(外显5)两侧，跨越200~300kb区域。 　　该基因特点为：第一，在脆性区域端检测有很多Alu 序列，富含AT，可能是DNA 复制起点；第二，几乎所有的外显子以AC 序列结束。在高等生物里，Alu重复序列被认为与DNA 的重复有关［4］ 。因此当某些器官暴露于一些致癌因素作用便会使DNA 复制受到干扰，从而引起此脆弱位点的断裂，导致基因缺失。 　　2 FHIT蛋白的结构及功能 　　Ohta等［1］发现FHIT基因编码的FHIT蛋白由147个氨基酸组成，并对其进行了同源性分析，由于其序列和HIT (histidine triad，组氨酸三联体) 蛋白相似，所以认为FHIT蛋白是HIT蛋白家族中的一员。其109个核心氨基酸与酵母菌Schizosaccharomyces pombe的Ap4A水解酶(5’, 5”‘P1 , Ptetraphosphat hydrolase二腺苷四磷酸水解酶)有57个相同(52%)、76个氨基酸相似(69%)。Ap4A水解酶能将Ap4A底物不对称地分解为ATP和AMP。FHIT蛋白与Ap4A水解酶间的相似性提示FHIT蛋白可能也是一种酶。Barnes等［5］发现FHIT蛋白是一种典型的二腺苷三磷酸水解酶(5’, 5”‘P1,P3triphosphate hydrolase,Ap3A)，可水解ApnA(n=3-6)成为ADP和AMP，其最适底物为Ap3A；FHIT蛋白在序列上与HIT蛋白相关，而HIT蛋白家族的结构特征由4个保守组氨酸(H35,H94,H96,H98)组成，其中3个组氨酸构成一个组氨酸三联体(HIT)序列HXHXH：X常为缬氨酸。通过位点直接诱变法表明FHIT蛋白质的完整功能需4个保守的组氨酸，随着组氨酸诱变成为天门冬酰胺，Ap3A水解酶活性也逐渐下降，其中央组氨酸三体是Ap3A水解酶活性绝对必需的，Mn2+和Mg2+可刺激其活性，而Zn2+可抑制其活性。 　　FHIT蛋白在人体所有组织中均有表达,但它在体内的具体功能还不清楚。研究发现APnA在动物细胞中的浓度对环境改变及应激的反应非常敏感，是调节细胞增殖、分化、凋亡的可能信号系统或对外界刺激的报警系统［6］。现已知：①FHIT基因突变将导致Ap3A水解酶活性丧失,引起Ap3A水平升高。Ap3A是ATP类似物，能抑制蛋白激酶的活性，其水平升高可能增强生长信号传导途径,阻断抑制途径或凋亡通道导致肿瘤的产生［5］。②mRN