中药茺蔚子炮制工艺优化探究.docVIP

中药茺蔚子炮制工艺优化探究 　　[摘要] 目的 改进中药茺蔚子的炮制工艺，考察影响中药茺蔚子的炮制因素。 方法 设计正交试验，考查中药茺蔚子的酒炒工艺，并对其进行多因素分析。考察标准以茺蔚子中盐酸水苏碱为指标，采用高效液相色谱结合蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)对其进行含量测定，采用方差分析等统计学方法分析数据，找出最佳的优化方案。 结果 水煎煮提取的最佳工艺为A1B3C3，即加水煎煮3次，第1次加8倍量水，浸泡1 h，煎煮1.5 h;第2次加6倍量水，煎煮1.5 h，第3次加6倍量水，煎煮1.5 h，滤过，合并滤液。炮制最佳工艺为A3B2C1D3，即使用25%加酒量浸润茺蔚子药材10 min后，将其在150℃下炒制5 min后即得。 结论 炮制的方法直接影响中药茺蔚子中盐酸水苏碱的含量，本研究为改进中药茺蔚子的最佳炮制工艺提供了参考依据。 　　[关键词] 茺蔚子;炮制工艺优化;盐酸水苏碱;高效液相色谱结合蒸发光散射检测器 　　中药茺蔚子又名益母草子，为唇形科植物益母草(Leonurus japonicus Houtt.)的干燥成熟果实[1]。药材多秋季果实成熟时采割地上部分，晒干，打下果实，除去杂质。该中药首载于《神农本草经》，味辛、苦，性微寒。归心包、肝经，具有活血调经、清肝明目的功能，用于目赤肿痛或目生翳膜，酒炒品治疗头目之疾最佳[2-4]。“炒制”和“净制”两种炮制方法是目前中药茺蔚子的主要炮制方法。为传承其炮制理论和优化其炮制方法，进一步使中药茺蔚子更好地发挥功效，本研究以酒炒法为主要方法，考察影响酒炒工艺的因素和水平，采用正交试验的方法进一步优化和改进炮制工艺方法，对不同炮制方法制得的炮制样品进行试验比较。 　　1 仪器与试药 　　高效液相色谱仪(LC-10ATvP型，日本岛津公司)，蒸发光散射检测器(上海分析仪器有限公司)，空气压缩泵(天津市分析仪器厂)，超声波提取器(上海分析仪器有限公司)，85-2A数显测速恒温磁力搅拌器(金坛市荣华仪器制造有限公司)，80-2型电动离心机(江苏金坛市金国胜实验仪器公司)，百万分之一电子天平，十万分之一电子天平;水为超纯水，磷酸、乙腈为色谱纯;盐酸水苏碱对照品(批号：110710-201310，规格为20 mg，中国药品生物制品鉴定所)。 　　茺蔚子药材[5]，经长春中医药大学姜大成教授鉴定为真品。 　　2 方法与结果 　　2.1 对照品溶液的制备 　　取盐酸水苏碱对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加70%乙醇制成每1毫升含0.5 mg的溶液，即得。 　　2.2 供试品溶液的制备 　　取研磨后的茺蔚子粉末过四号筛，取过筛后的药材粉末约0.25 g，精密称定后记录其准确重量，转入完全干燥的50 ml具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇25 ml，加塞，精密称定重量，记录，置入超声提取器中(频率40 kHz，功率250 W)处理30 min，待完全放冷后，再精密称定其重量，使用70%乙醇补足与第1次称量相比减少的重量，充分摇匀，置入漏斗中滤过，弃除滤液，精密取一定量续滤液，70%乙醇定容后即为供试品溶液[6-8]。 　　2.3 标准曲线的考察 　　取盐酸水苏碱对照品，精密称4.87 mg，完全转入10 ml棕色容量瓶中，先加一定量70%乙醇溶解，待溶解完全后，继续加乙醇定容至刻度，充分摇匀，即得(每1毫升含盐酸水苏碱对照品0.487mg)。分别精密吸取上述盐酸水苏碱对照品溶液1、3、5、7、9 mu;l，注入液相色谱仪，分别记录相应的峰面积值，其中，横坐标为进样量(mu;g)取对数后的值(X)，纵坐标为峰面积积分取对数后的值(Y)，制作标准曲线图(图1)。结果回归方程为Y=1.5503X+2.1495，r=0.9999，提示，盐酸水苏碱线性范围为0.487～4.383 mu;g时，进样量的对数值与峰面积积分的对数值之间有良好的线性关系[9-11]。 　　2.4 茺蔚子提取方法的考察 　　遵循中药汤剂的煎煮方法，确定水作为提取溶剂，提取方法选择热法提取，即煎煮法，且固液分离时应注意趁热滤过，使药效物质较少损失，以保证较高的提取率及临床疗效[12-13]。根据上述原则，对水煎煮提取工艺条件进行试验研究。试验考察了3个因素包括药材的加水量、煎煮时间及煎煮次数，其中每个因素考察了3个水平，根据因素和水平设计L9(34)的正交试验(表1)，考虑到试验中可能存在误差的影响，每次试验平行3次。其中药材的浸泡时间采用单因素实验法，以直观考察进行评价;其他因素采取L9(34)正交设计实验法，以茺蔚子中有效成分盐酸水苏碱的含量为考察指标，优选最佳提取工艺参数。由方差分析表可知各因素影响的重要性顺序为Bgt;Cgt;A，提示对试验有显著性影响的主要因素为煎煮次数和煎煮时间，即主要影响因素是煎煮次数B