二甲双胍对胰岛素抵抗大鼠白细胞介素-6表达影响.docVIP

二甲双胍对胰岛素抵抗大鼠白细胞介素-6表达影响 　摘　要：目的：观察二甲双胍对胰岛素抵抗大鼠IL-6表达的影响，探讨二甲双胍改善胰岛素抵抗的作用机制。方法：29只正常雄性大鼠随机分为：正常饮食对照组（n=9），高脂高糖喂养造模组（n=20）。喂养6周后，将造模成功的17只IR大鼠再随机分为两组：①模型组：继续予高脂高糖饮食；②二甲双胍组：高脂高糖喂养加二甲双胍[300 mg/（kg·d）]；6周干预后，观测胰岛素抵抗大鼠IL-6表达的变化。结果：高脂高糖饲养6周后，造模组FBG、FINS均高于对照组，ISI低于对照组（P均＜0.01）。与模型组比较，药物组血清IL-6、脂肪和肝脏组织IL-6 mRNA的表达均降低（P均＜0.05），ISI均升高（P＜0.05）。结论：下调IL-6的表达可能是二甲双胍改善大鼠胰岛素抵抗的机制之一。 关键词：胰岛素抵抗；二甲双胍；白细胞介素-6 胰岛素抵抗为多种疾病如：2型糖尿病、冠心病、肥胖、高脂血症等的共同发病基础，如何改善胰岛素抵抗是当前临床关注的重点问题之一[1-4]。白细胞介素-6（Interleukin-6，IL-6）既是脂肪细胞因子，也是炎性反应因子，有研究显示IL-6水平的升高对胰岛素抵抗的发生与发展起着推波助澜的作用[5]。二甲双胍为双瓜类降糖药，其公认的降低血糖机制为：①增加外周组织对胰岛素的敏感性，增加胰岛素介导的葡萄糖利用；②增加非胰岛素依赖组织对葡萄糖的利用；③抑制肝糖原异生，减少肝糖输出；④抑制肠壁细胞摄取葡萄糖；⑤抑制胆固醇的生物合成和储存，降低血三酰甘油、总胆固醇水平。对于二甲双胍是否能能影响组织白细胞介素-6的表达少有报道。实验以高脂高糖饮食建立胰岛素抵抗的动物模型，观察二甲双胍对胰岛素抵抗大鼠IL-6表达的影响，探讨二甲双胍改善胰岛素抵抗的作用机制。 1 资料与方法 1.1 一般资料：实验动物及试剂：健康8周龄雄性Sprague-Dawley大鼠30只，体重160～200 g，中国科学院上海实验动物中心提供。胰岛素放免试剂盒购自北京原子高科核技术应用股份有限公司；大鼠IL-6试剂盒购自上海森雄科技实业有限公司；PCR引物购自上海生工生物技术服务有限公司。 1.2 方法 1.2.1 动物分组及处理：所有大鼠均以基础饲料适应性喂养1周。根据随机数字表法，首先将存活的29只大鼠随机分为对照组（9只）和造模组（20只）。对照组一直予以基础饲料喂养直至实验结束，造模组予以高脂高糖饲料喂养。造模6周后，将造模组中ISI低于对照组的-2 s的大鼠视为造模成功大鼠，剔出造模不成功的大鼠[6]。将造模成功的17只大鼠按照随机数字表法，再随机分为①模型组（9只）：继续予高脂高糖饮食；②二甲双胍组（8只）：高脂高糖喂养加二甲双胍[300 mg/（kg·d）]；各干预组大鼠予为期6周的不同方法进行干预。 1.2.2 标本的采集：血清：分别于造模6周和干预6周后48 h，大鼠禁食12 h过夜，次日采血分离血清保存，待测血清学指标；组织：取肝脏和内脏脂肪组织并称重。留取肝脏和大网膜脂肪组织，一部分用于RT-PCR检测，另一部分用于HE染色。 1.2.3 实验指标测定方法：①剪尾法快速血糖仪测FPG；②放免法测FINS，并计算ISI；③酶法测定TG、TC、HDL，按公式计算LDL；④ELISA法测血清IL-6；⑤脂肪和肝脏组织HE染色；⑥RT-PCR测IL-6 mRNA的表达。 1.3 统计学分析：所有数据和表格用SPSS 11.5统计软件处理，数据以均数±标准差（）表示所有结果。数据方差齐性用Levene检验；两样本均数比较采用独立样本t检验统计；多样本均数比较采用单因素方差分析和重复测量数据的两因素多水平方差分析；组间两两比较采用LSD-t检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 大鼠喂养一般情况：30只大鼠分组喂养前，对照组体重为（175.78±23.18）g，造模组体重为：（177.52±11.31）g。两组大鼠体重比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。适应喂养时有1只大鼠死亡。29只大鼠干预过程中，药物组有1只大鼠灌胃时死亡。 2.2 各观测指标结果 2.2.1 高脂高糖饲养6周后：造模组FBG、FINS均高于对照组，ISI低于对照组（P均＜0.01），见表1。 表1 造模6周后两组大鼠情况比较（） 分组只数Weight（g）FPG（mmol/L）FINS（mIU/L）ISI对照组9 301.33±31.88　5.07±0.95 12.54±3.34 -4.11±0.33模型组19 312.68±42.52　6.75±0.97① 31.58±5.73① -5.34±0.21①注：与对照组比较，①P＜0.