低氧环境下三氧化二砷对人肺癌细胞增殖及凋亡作用.docVIP

低氧环境下三氧化二砷对人肺癌细胞增殖及凋亡作用 　 作者：沈捷, 曲歌平, 修清玉, 李兵 【摘要】 目的：观察常氧和低氧环境下不同浓度的三氧化二砷（arsenic trioxide, As2O3）对人肺腺癌细胞A549增殖和凋亡的影响。方法：在常氧（21% O2）和低氧（5% O2）环境下对人肺腺癌细胞A549进行体外培养，采用0、1、2、4 μmol/L As2O3分别作用A549细胞12、24和48 h，甲基噻唑基四唑（methyl thiazolyl tetrazolium, MTT）法检测A549细胞增殖抑制率；膜连蛋白Ⅴ（Annexin Ⅴ）/碘化丙啶（propidium iodide, PI）双标记法检测细胞凋亡。结果：常氧和低氧环境下，1、2、4 μmol/L As2O3均能显著抑制A549细胞增殖，促进细胞凋亡，且会随As2O3浓度的升高和作用时间的延长而增强；该作用在两种环境下的差异无统计学意义。结论：As2O3可抑制A549细胞增殖和促进细胞凋亡；在低氧环境和常氧环境下对A549细胞具有同样的细胞毒性作用。 【关键词】 砷化合物; 低氧; 细胞凋亡; 细胞增殖; 肺癌 　　Objective: To observe the effects of different concentrations of arsenic trioxide (As2O3) on apoptosis and proliferation of human lung cancer cell line A549 in vitro under hypoxia and normoxia. 　　Methods: A549 cells were treated with 0, 1, 2, 4 μmol/L As2O3 for 12, 24 and 48 h under hypoxia (5% O2) and normoxia (21% O2). The proliferative inhibition rate of A549 cells was measured with methyl thiazolyl tetrazolium assay, and the apoptotic rate of A549 cells was detected by Annexin Ⅴ/propidium iodide (PI) double staining. 　　Results: Under normoxia and hypoxia, 1, 2, 4 μmol/L As2O3 could significantly inhibit the proliferation of A549 cells and induce the apoptosis of A549 cells. The results depended on the drug concentration and action time. And the hypoxia couldn’t influence the effects of As2O3. 　　Conclusion: As2O3 can inhibit the proliferation and induce the apoptosis of A549 cells under hypoxia and normoxia. 　　Keywords: arsenic compounds; hypoxia; apoptosis; cell proliferation; lung cancer 　　三氧化二砷（arsenic trioxide, As2O3）可通过改变肿瘤细胞内多种信号转导途径，发挥抑制瘤细胞生长，促进瘤细胞分化，阻滞血管形成等细胞毒性作用［13］。我国首先将As2O3应用于急性早幼粒细胞白血病的治疗，进而研究发现它对多发性骨髓瘤、淋巴瘤等血液系统肿瘤及肝癌［4］、乳癌［5］、卵巢癌［6］等实体瘤也有一定疗效。有研究显示As2O3在低氧状态下仍然对一些肿瘤细胞具有杀伤作用［79］，但其在低氧环境下对肺癌细胞的作用仍有待进一步深入研究。 　　本研究将不同浓度As2O3在常氧（21％ O2）和低氧（5％ O2）环境下，分别作用于人肺腺癌A549细胞，并持续作用一定时间，观察比较两种环境下As2O3对A549的影响，了解As2O3对肺癌细胞的作用，探讨其在肺癌临床治疗上的可行性。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验材料 F12K培养基、胰蛋白酶液，购自Invitrogen公司；新生小牛血清，购自杭州四季青生物制品所；膜连蛋白Ⅴ（AnnexinⅤ）FITC细胞凋亡检测试剂盒，购自晶美生物公司；甲基噻唑基四唑（methyl thi