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叶下珠多酚类化合物LC/MS分离鉴定 　【摘要】 　　［目的］ 分析 叶下珠多酚化合物的组成，为质量标准制订提供依据。［ 方法 ］叶下珠药材，以50%乙醇提取，乙酸乙酯萃取，萃取液过微孔滤膜后，采用LC/MS对各成分分离鉴定。［结果］叶下珠多酚是以芸香苷、叶下珠素和鞣花酸为主的化合物，游离的没食子酸含量很少。［结论］单以没食子酸为质量指标不合理，而以芸香苷、叶下珠素和鞣花酸总量为指标更具合理性。 【关键词】 叶下珠 多酚类化合物 HPLC/MS 　　Abstract:［Objective］To present the basis for qualitative control by analyzing the components of polyphenols in Phyllantuus urinaria L.［Method］Raw material was extracted by 50% ethanol，then purified by acetic ethyl. The extract was injected into LC/MS after filtering with micromembrane.［Result］The polyphenols mainly consisted of rutin，phyllansusiin，ellagic acid，etc，but less free gallic acid.［Conclusion］The total content of these compounds should be used for qualitative control instead of gallic acid. 论文代写 　　Key words:Phyllantuus urinaria L.；Polyphenols；HPLC/MS 　　叶下珠为大戟科叶下珠属植物叶下珠Phyllantuus urinaria L.的干燥全草，又名珍珠草、夜合草、阴阳草，主要分布在长江中下游和南方诸省。叶下珠具有平肝清热、利水解毒等功效，主要 治疗 小儿疳积、黄疸肝炎、肠炎痢疾等［1］。近来 研究 发现，叶下珠对乙肝患者具有明显疗效，因而成为研究的热点［2，3］。叶下珠成分复杂，含黄酮类、木脂素类、香豆素类、鞣质、有机酸等多种成分，有报道多酚化合物是其有效成分［4］。 目前 叶下珠有效成分多以没食子酸含量为质量检验标准［5］。由于多酚化合物有多种，以没食子酸为其有效成分指标是否具有合理性仍值得探讨。为了探讨合理的质量标准，本文采用HPLC/MS联用技术对叶下珠中多酚化合物进行了分离鉴定。 　　1 实验材料 　　1.1 药物与试剂 论文代写 　　药材购自广东肇庆地区，经鉴定为大戟科叶下珠Phyllantuus urinaria L.的干燥全草。甲醇，磷酸，均为色谱纯；水为超纯水。 毕业论文 　　1.2 仪器 论文代写 　　Agilent LCMS系统。含真空脱气机、四元高压梯度泵、恒温自动进样器、二极管阵列检测器（DAD），ESI接口、LCQ Advantage质谱仪。色谱和质谱数据的采集和处理由Agilent数据工作站完成。 　　2 方法 　　2.1 供试液的制备 　　取20g药材粉末，加50%乙醇300ml超声30min，过滤，浓缩滤液到50ml，用乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，浓缩到30ml左右，浓缩液经0.45μm滤膜滤过，取此滤液作为供试液。 　　2.2 色谱条件及方法 毕业论文 　　色谱柱Agilent C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇（A）-0.1%磷酸水（B），梯度洗脱系统（表1）；流速：0.6ml/min；柱温30℃；检测波长270nm；进样量5μl；柱后分流0.4ml/min进质谱仪；MS同时记录总离子流（TIC）色谱图。m/z扫描范围：150～1200；电喷雾离子化（ESI），采用阴阳离子模式检测，MS/MS的轰击能约为30%。记录时间为60min。表1 流动相梯度（略） 　　3 结果 毕业论文 　　3.1 叶下珠多酚化合物的HPLC分离效果 　 　　通过HPLC分离，共获得9个色谱峰，各峰得到较好地分离（图1）。从其相对含量比较，主要多酚化合物集中在4，5，6，7，8峰，占总面积的84.22%（表2）。表2 叶下珠提取物中多酚化合物的相对含量（略）　　3.2 叶下珠多酚化合物的质谱鉴定 论文代写 　　叶下珠多酚化合物对质谱的正、负离子检测均有较好的信号响应。根据化合物的荷质比及相关的 文献 ［6］,对图中的主要色谱峰进行了MS归属(表3)。表3 叶下珠多酚化合物的质谱数