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大蒜多糖组分B纯化及糖含量测定 　 作者：余薇, 查文良，夏勇，吴基良，陈凤 【摘要】 　　目的建立苯酚－硫酸法测定大蒜多糖组分B的含量。方法采用醇沉的方法分离纯化大蒜多糖组分B，以苯酚-硫酸显色后用紫外分光光度计测定吸光度,测定波长486 nm。结果在4.0～10.0 μg/ml内，浓度与吸光度呈良好线性关系。回归方程：A=0.069 4C-0.004 9 (r=0.999 6，n＝7)，平均回收率为101.27％ ，RSD为1.9％。大蒜多糖组分B的平均糖含量为83.37% ，RSD为2.5％(n=5)。结论该方法简便、准确、精密度高、重现性好,为生产的质量控制及进一步研究奠定良好的基础。 【关键词】 大蒜多糖组分B 苯酚-硫酸法 含量测定 　　Abstract:ObjectiveTo develop phenol-sulfuric acid method for the determination of polysaccharides B from garlic.MethodsGarlic Polysaccharides B was extracted and purified through ethanol precipitation, the content was determined by phenol-sulfuric acid at 486 nm. ResultsIn the range of 4.0～10.0 μg/ml, there was an excellent linear shape between the concentration and absorbence. The regression equation was A=0.069 4C-0.004 9(r=0.999 6,n=7)and the average recovery was 101.27% with RSD=1.9%. The average polysaccharides content B from garlic was 83.37%,RSD=2.5% (n=5). ConclusionThe method is simple and accurate and it can be used for the quality control of polysaccharides form garlic. 　　Key words:Garlic polysaccharides B； Phenol-sulfuric acid； Content determination 　　多糖的研究起自20世纪60年代，从20世纪70年代开始逐渐发现多糖及其复合物(蛋白多糖和脂多糖)具有多方面的药理作用，主要包括：增强免疫、抗肿瘤、活血抗栓、降血压、降血脂、降血糖、抗衰老、增强骨髓造血机能、抗辐射、对肝肾等主要脏器具有保护作用。中药多糖的化学研究范围涉及提取、分离、纯化等方面［1,2］。目前我国对大蒜多糖的研究主要在于药理方面［3,4］，涉及结构分析、定性定量、分子量确定等领域较少。大蒜多糖是大蒜的醇沉部分，有大蒜多糖组分A、B和C 3种成分，笔者对大蒜多糖组分B进行了含量测定，旨在为大蒜多糖的研究提供基础资料。 　　1 材料与仪器 　　1.1 药材市售山东产大蒜。 　　1.2 试剂葡萄糖标准品，上海化学试剂公司；苯酚，上海化学试剂公司；硫酸(分析纯)，上海化学试剂有限公司；95％ 乙醇；蒸馏水。 　　1.3 仪器UV-754型紫外可见分光光度计；FA1104电子分析天平。 　　2 方法与结果 　　2.1 大蒜多糖组分B的分离纯化新鲜大蒜去皮碾碎，无水乙醇浸泡脱脂，在沸水浴中用4～5倍双蒸馏水提取8 h，滤液用乙醇沉淀，得多糖组分B粗品，粗品用Sevage法去蛋白后在55℃下干燥至恒重得大蒜多糖组分B 精制品。纯化后大蒜多糖在紫外可见光谱段进行扫描，结果显示在190 nm处有多糖的特征吸收峰，而在260和280 nm 处无吸收，表明大蒜多糖组分B中无蛋白质成分。 见图1。 　　2.2 试剂的配制 　　2.2.1 标准品溶液的制备精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖7.0 mg置100 ml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀即得浓度为70 μg/ml的标准品溶液。 　　2.2.2 供试品溶液的制备精密称取55℃干燥至恒重的大蒜多糖组分B 10.0 mg置100 ml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀即得浓度为100 μg/ml的多糖供试品液。 　　2.2.3 5%苯酚试剂的配制取苯酚100 g，加铝片0．2 g和NaHCO3 0.1 g，蒸馏,收集180～182℃ 馏分。精密称取精制苯酚5.0 g以蒸馏水溶解后转至100 ml容量瓶中定容，摇匀，