放射损伤对外源骨髓间充质干细胞迁徙定植影响.doc

放射损伤对外源骨髓间充质干细胞迁徙定植影响 　【摘要】 研究机体中枢神经系统受放射损伤时骨髓间充质干细胞（ＭＳＣｓ）的迁徙定植特性的改变，从而为应用ＭＳＣｓ治疗中枢神经系统放射损伤提供理论和实验依据。 【方法】用８周龄ＳＤ大鼠接受２２ＧｙＸ线照射制作枢神经系统放射损伤模型；从ＧＦＰ鼠抽取骨髓，分离和扩增ＭＳＣｓ。中枢神经系统受放射损伤的ＳＤ大鼠４个月后予静脉输注ＧＦＰ-ＭＳＣｓ。于移植后几个时间点取脑、骨髓、肝、脾等做冰冻切片，用双光子共聚焦红外脉冲激光显微镜检测ＧＦＰ-ＭＳＣｓ。 【结果】 在最早２４ ｈ内实验组和对照组的骨髓中检测到外源性ＧＦＰ阳性细胞，至第７天后实验组骨髓中ＧＦＰ阳性细胞显著多于对照组。脑内第１天未检测到外源性ＧＦＰ阳性细胞，第４天后中枢神经系统受放射损伤的ＳＤ大鼠，脑组织检测到带绿色荧光的外源性ＧＦＰ阳性细胞；而对照组脑内一直未检测到带绿色荧光的外源性ＭＳＣｓ。实验组和对照组脾脏在输注ＭＳＣｓ后第１天即检测到大量ＧＦＰ阳性细胞，并持续存在，第２１天实验组ＧＦＰ阳性细胞较对照组减少。【结论】 在放射损伤条件下外源性ＭＳＣｓ可透过血脑屏障到达脑组织，中枢神经系统放射损伤可诱导外源性ＭＳＣｓ向脑组织迁徙定植。 【关键词】 放射损伤 中枢神经系统 骨髓间充质干细胞 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： 【Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ】 Ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒ ｏｆ ｔｈｅ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ （ＭＳＣｓ） ｍｉｇｒａｔｉｎｇ ａｎｄ ｈｏｍｉｎｇ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｔｓ ａｆｔｅｒ ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ， ｔｏ ｓｅｅｋ ｔｈｅ ｃｕｅ ａｎｄ ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｆｏｒ ｉｒｒａｄｉａｔｉｎｇ ｄａｍａｇｅ ｉｎ ｃｅｎｔｒａｌ ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ（ＣＮＳ） ｗｉｔｈ ＭＳＣｓ． 【Ｍｅｔｈｏｄｓ】 Ｂｒａｉｎｓ ｏｆ ８-ｗｅｅｋ ｏｌｄ Ｓｐｒａｇｕｅ-Ｄａｗｌｅｙ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ２２ Ｇｙ ｓｉｎｇｌｅ ｄｏｓｅ ｏｆ Ｘ-ｒａｙ． Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｆｌｏｒｅｓｃｅｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ （ＧＦＰ） ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ， ｅｘｐａｎｄｅｄ， ａｎｄ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄ ｉｖ ｔｏ ＳＤ ｒａｔｓ ａｒｏｕｎｄ ４ ｍｏｎｔｈｓ ａｆｔｅｒ ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｒａｉｎ． Ａｔ ｃｅｒｔａｉｎ ｔｉｍｅ ｐｏｉｎｔｓ ａｆｔｅｒ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｔｈｅ ｂｒａｉｎ， ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｔｉｓｓｕｅｓ ｗｅｒｅ ｒｅｍｏｖｅｄ ａｎｄ ｆｒｏｚｅｎ． Ｃｒｙｏｓｔａｔ ｓｅｃｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｐｒｅｐａｒｅｄ ａｎｄ ｅｘａｍｉｎｅｄ ｂｙ ｔｗｏ ｐｈｏｔｏｎ ｃｏｎｆｏｃａｌ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ． 【Ｒｅｓｕｌｔｓ】 ＧＦＰ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｉｎ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｏｆ ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ ａｎｉｍａｌｓ ａｎｄ ｕｎｉｒｒａｄｉａｔｅｄ ａｎｉｍａｌｓ ２４ ｈ ａｆｔｅｒ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ． Ｎｏ ＧＦＰ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｉｎ ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ ａｎｄ ｕｎｉｒｒａｄｉａｔｅｄ ｂｒａｉｎｓ ａｔ ｅａｒｌｙ ｔｉｍｅ ｐｏｉｎｔ ｏｆ ２４ ｈ ａｆｔｅｒ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ． Ｉｔ ａｐｐｅａｒｅｄ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｆｏｒ ＧＦＰ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ＣＮＳ ｏｆ ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ ＳＤ ｒａｔｓ ａｔ ｄａｙ ４ ａｆｔｅｒ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ． Ｉｎ ｓｐｌｅｅｎｓ，ａ ｌｏｔ ｏｆ ＧＦＰ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｉｎ ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ ａｎｄ ｕｎｉｒｒａｄｉａｔｅｄ ａｎｉｍａｌｓ ｏｆ ａｌｌ ｔｉｍｅ ａｎｄ ａｔ ｔｈｅ ２１ｓｔ ｄａｙ，ｔｈｅ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ＧＦＰ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｒｅｄｕｃｅｄ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｃｏｎｔｒｏｌ． 【Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ】 Ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ ｍａｙ ｅｎｈａｎｃｅ ｐａｓｓｉｎｇ ｔｈｒｏｕｇｈ ｂｌｏｏｄ-ｂｒａｉｎ ｂａｒｒｉｅｒ ｏｆ ＭＳＣｓ ａｎｄ ｉｎｄｕｃｅ ｔｈｅ ｈｏｍｉｎｇ ａｎｄ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＭＳＣｓ ｉｎ ｔｈｅ ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ ｒａｔｓ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ； ｃｅｎｔｒａｌ ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍ； ｍｅｓｅｎｃｈｙｍ