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紫外分光光度法测定紫云英蜜中总酚含量 　作者：张赛群 梁妍 杨杰 彭佼 朱洁 【摘要】 目的：建立紫云英蜜中总酚含量测定方法。方法：采用Folin酚法，样品经福林试剂显色反应后，紫外可见分光光度计测定其总酚含量。结果：总酚在2.03～8.04 μg·mL-1内线性良好，r=0.9997，且平均回收率为102.42%，RSD=2.64%(n=5)。结论：该方法准确，简便，重现性好，专属性强，可有效地控制紫云英蜜的质量。 【关键词】 肖公蜜 总酚 Folin酚法 紫外分光光度法 　Abstract Objective ：To establish a UV method for determination of the content of total hydroxybenzene for Ziyunyingmi. Method： FolinDenis was adopted of determining the content of total hydroxybenzene by UV.Result：The total hydroxybenzene showed a good linear relationship at 2.03～8.04 μg·mL-1，r=0.9997，the average recovery was 102.42 %, RSD =2.64 %(n=5). Conclusions： The method is accurate and simple with good reproducibility, and can control the quality of this preparation effectively. 　　Key words ziyunyingmi；total hydroxybenzene；FolinDenis；UV 　　紫云英蜜又名红花草蜜或草子蜜，具有大自然清新宜人的草香味，甜而不腻，鲜洁清甜，色泽为浅琥珀色。富含多糖、多酚、氨基酸、维生素、微量元素等多种营养成分，长期饮用可补气血，健脾胃，增强抗病能力，强身健体。且其中的多酚酸具有抗病原微生物、抗炎症、抗变态反应、抗心血管疾病和抗氧化等作用［1，2］。为了控制产品质量，我们采用Folin酚法对贵州不同产地的紫云英蜜中总多酚含量进行了研究。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器 紫外可见分光光度计（岛津2401）;超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司KQ2508型）;恒温水浴锅（余姚市亚星仪器仪表有限公司）。 　　1.2 试药 原儿茶酸对照品（批号：110809200503）；钨酸钠，磷钼酸，85%磷酸，Na2CO3，以上试剂均为分析纯；水为蒸馏水； 　　1.3 福林试剂的配制［3］： 称取钨酸钠40 g，磷钼酸8 g和85%磷酸20 mL，溶于300 ml蒸馏水，煮沸加热回流2 h，冷却，稀释至400 mL，置于棕色瓶中保存。 　　1.4 Na2CO3溶液的配制 称取15 g Na2CO3，溶于200 mL蒸馏水中，即为75 g·L-1Na2CO3溶液。 　　　2 方法与结果 　　2.1 对照品溶液的制备 原儿茶酸对照品的配制：称取原儿茶酸对照品15.80 mg于50 mL容量瓶中，蒸馏水溶解并定容，摇匀，备用，浓度为316 μg·mL-1。 　　2.2 供试品溶液的制备 取同一批样品，精密称定，置于50 mL容量瓶中，超声使溶，过滤，取20 mL续滤液定容成50 mL，摇匀，备用。 　　2.3 测定方法 精密吸取适量样品溶液1 mL于10 mL带塞离心管中，加入2.5 mL福林试剂，放置5 min，再精密加入Na2CO3溶液2mL，50℃水浴保持5 min，再取出室温放置2 h，于760 nm左右测定吸光度值。 　　2.4 标准曲线的制备 从原儿茶酸标准储备液中分别吸取1，1.5，2，2.5，3，3.5 mL于25 mL容量瓶中，蒸馏水稀释定容，摇匀，浓度分别为12.64 μg·mL-1 ，18.96 μg·mL-1，25.28 μg·mL-1，31.60 μg·mL-1，37.92 μg·mL-1，44.24 μg·mL-1，分别从中精密吸取1 mL，按2.3 测定方法反应，测定吸光度值。以终浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，得回归方程为Y=0.0932X- 0.0315，r=0.9997。结果表明总酚在12.64 μg·mL-1～44.24 μg·mL-1范围内线性良好。 　　2.5 精密度试验 取同一份对照品按上述反应后连续测定5次，吸光度值RSD=0.386%。结果表明仪器精密度良好。 　　2.6 样品吸光度值稳定性试验 按2.2供试品溶液制备方法制备样品液，并按2.3测定方法反应后