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苦参生物碱抗肿瘤机理探究进展 　 作者：李娜,李海芳,肖渊,王志斌 【关键词】 苦参；生物碱；抗种瘤；综述 苦参为豆科植物苦参Sophora flavescens Aitl的干燥根,具有清热燥湿、杀虫、利尿的功能。现代研究表明,苦参含有生物碱类、黄酮类、皂苷类、挥发油等多种化学成分；其中生物碱又分为苦参碱型、金雀花碱型、无叶豆碱型及羽扇豆碱型等不同类型的生物碱。近年来,体内和体外实验对上述生物碱成分提取分离、药理作用和临床研究有很大进展。这一类生物碱的基本骨架是奎诺里西啶(Quinolizidime),具有平喘、解热镇痛、抗病毒、消炎、提高免疫功能、抗肿瘤等多方面药理活性。其中以苦参碱和氧化苦参碱的抗肿瘤活性最强[1]。 　　苦参碱和氧化苦参碱是中药苦参中抗肿瘤的主要活性成分,广泛存在于豆科植物苦参、苦豆子及广豆根中。研究表明,苦参碱和氧化苦参碱通过抑制肿瘤细胞增殖、转移,诱导其凋亡及向正常细胞分化,抑制细胞粘附及血管转移,调节免疫,以及抑制癌基因及原癌基因的表达,而具有抗肿瘤的活性,现对苦参碱及氧化苦参碱的抗肿瘤作用机制作简要归纳。 　　1 抑制肿瘤细胞增殖 　　苦参碱和氧化苦参碱能有效地抑制多种肿瘤细胞增殖,其抑制效果与时间、浓度相关。研究表明,苦参碱能有效地抑制人肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721以及人慢性髓性白血病细胞系K562的增殖,MTT试验显示：苦参碱对HepG2及K562抑制作用呈量-效和时-效关系。随着作用时间延长和药物浓度的增加, HepG2及K562细胞存活率明显降低,同时细胞DNA合成亦相应降低,具有直接杀伤作用[2-3]。苦参碱抑制肿瘤细胞增殖的机理可能主要有以下几点。 　　1.1 作用于细胞周期,而使细胞增殖受抑制 　　实验观察,用0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mg/mL氧化苦参碱处理SMMC-7721细胞2～3 h后,经流式细胞仪分析显示,可增加G0/G1期细胞所占百分比,降低S期G2/M期的百分比[4]。对K562细胞周期的影响研究结果显示：苦参碱作用K562细胞72 h后,4.6%的肿瘤细胞阻滞于G1期[5],而S期细胞数明显少；提示苦参碱对细胞产生的抑制是阻止细胞进入S期,使细胞堆积于G0/G1期,因此可以推测,苦参碱可以抑制DNA的合成。 　　1.2 作用于相关酶,影响其活性 　　乳酸脱氢酶(LDH)是细胞无氧酵解的关键酶,在肿瘤细胞无氧酵解代谢中相当旺盛,有文献报道,白血病患者血清的LDH活性明显高于正常人,且其主要来源于白血病细胞,因此,可将LDH活性变化作为白血病细胞增殖的指标之一[6]。 用苦参碱作用于K562细胞后的结果显示,0.2～0.3 mg/mL的苦参碱作用后的K562细胞的LDH活性明显小于无苦参碱作用的对照组和0.1 mg/mL的苦参碱作用的处理组,3 d后达到稳态。可见,苦参碱能降低LDH的活性[7],通过降低LDH的活性而阻断肿瘤细胞的无氧酵解,从而阻断肿瘤的发展。 　　2 诱导肿瘤细胞的分化和凋亡 　　细胞分化障碍是肿瘤细胞的一个重要生物学特征,它是由于正常基因功能受控于错误的表达程序所致[8]。分化是一个定向的严密调节的程序控制过程,恶性肿瘤是细胞分化和胚胎发育过程中的一种异常表现。 　　苦参碱能明显改变K562细胞的形态。在作用前K562细胞胞体大小不均、形状不规则、多呈圆形、胞浆多有瘤状突起、胞核大而不规则、含数个核仁。0.1 mg/mL苦参碱作用5 d后K562细胞胞体变小、胞核变小、染色质密集、核仁消失、核浆比例减小,类似于中幼红和晚幼红细胞,显示苦参提取液能够诱导K562细胞向红细胞系、巨核细胞系和单核细胞系分化[9]。1.0 mg/mL苦参碱作用24 h,30%的K562细胞可出现明显的空泡,并有凋亡小体,末端标记法也检测到凋亡的出现。所以,0.1 mg/mL苦参碱能够诱导肿瘤细胞的分化,而1.0 mg/mL苦参碱能使肿瘤细胞发生凋亡[10],故可以推测,苦参碱在低剂量时诱导细胞分化,而在高剂量时诱导细胞凋亡。 　　苦参碱诱导细胞分化与其抑制细胞周期有密切关系,实验表明,苦参碱作用后,HL-60细胞被阻滞在G1期,从而导致增殖减慢,进而趋向分化[11]。其诱导细胞分化和凋亡的机制可能与苦参碱上调G1细胞周期负调节因子的表达及凋亡相关基因表达、下调G1期正调节因子Cyclin D1表达及抗凋亡相关基因表达有关[12]。另外,可能与其抑制c-myc基因表达相关[13]。经苦参碱作用后,HL-60 细胞及U251胶质瘤细胞中的c-myc基因表达明显被抑制[11,14]。 　　3 抑制细胞粘附因子的表达及血管内皮细胞转移 　　癌细胞的浸润转移与内皮细胞膜表面的粘附相关