荨麻提取物对5α-还原酶抑制活性探究.docVIP

荨麻提取物对5α-还原酶抑制活性探究 　 作者：冀保全 杨爱岗 朱永宁 逄越 唐玲 冯宝民 王永奇 【摘要】 　　目的研究荨麻提取物中水溶性成分的5a-还原酶抑制活性。方法基于荧光测定的方法，建立一种5a-还原酶抑制剂体外模型，从大鼠前列腺组织中提取5α-还原粗酶,与底物睾酮（Testosterone）以及供氢体还原型辅酶Ⅱ（NADPH）共同组成了一种微量反应体系。利用荧光测定仪检测NADPH的含量，以荧光的强弱来判断5a-还原酶的活性，以非那雄胺作为阳性对照。结果同对照组相比，反应体系中加入荨麻提取物后荧光值有显著升高。结论荨麻根的水溶性成分在体外能够抑制5a-还原酶的活性。 【关键词】 5α-还原酶 荨麻 双氢睾酮 前列腺增生 　　Abstract:ObjectiveTo study the 5α-reductase inhibitory activity of the aqueous constituents in Urtica fissa E. Pritz’s ectract. MethodsThe 5α-reductase inhibitor’s model in vitro included a mini-reactive system which was composed of 5α-reductase extracted from the prostates of male rats, testosterone (as a substrate) and NADPH (as a hydrogen supplier). The concentration of NADPH was measured by the fluorescence examinination. The specificity of 5α-reductase was judged with finasteride as a positive control. ResultsThe absorbance of fluorescence in the reactive system which was added with the extract of Urtica fissa E. Pritz was remarkably higher than the reference group.Conclusion The Urtica fissa E. Pritz’s aqueous extract can inhibit the activity of the 5α-redutase in vitro. 　　Key words:5α-reductase； Urtica fissa E. Pritz； Dihydrotestosterone (DHT)； Benige Prostatic Hyperplasia(BPH) 良性前列腺增生症(BPH) 是中老年男性常见病与多发病，发病率在40 岁时约为23%， 至90 岁时可达88%。在寻找其治疗药物过程中，甾体5α- 还原酶抑制剂已成为研究热点之一［1］。从构效关系看，5α-还原酶是定位于靶细胞微粒体上的膜蛋白,依赖还原型辅酶II(NADPH) 作为供氢体，该酶广泛存在于前列腺及其它组织和器官中，是睾酮转变为双氢睾酮的催化剂［2］，它不可逆地催化睾丸酮 (T)转为生理活性更强的双氢睾丸酮 (DHT)，DHT被认为是良性前列腺增生症(BPH)的主要病因, 抑制该酶活性, 减少DHT生成，已经成为BPH 非手术治疗的主要途径［3］。 我们前期的药理实验表明，荨麻根的提取物对去势大鼠前列腺腹侧叶和背侧叶的增生具有显著的抑制作用［4］。为了进一步研究提取物抗前列腺增生的作用机理，本实验选取5α-还原酶为作用靶点，利用荧光测定的方法，研究荨麻提取物是否有抑制5α-还原酶的活性。 首先建立酶催化反应体系，利用辅酶NADPH具有自发荧光特性（NADPH本身有强烈荧光，当NADPH与还原酶和底物反应后，NADPH生成NADP+, 荧光随之淬灭）通过荧光检测仪测定NADPH的含量来考察5α-还原酶的活性［5］。 　　1 材料与仪器 　　1.1 药品与试剂非那雄胺(保列治), Merck Sharp amp; Dohme (U.K.)Ltd。批号睾酮，上海久邦化工公司产品，批NADPH，Biosharp公司产品， 批号041939；其他化学试剂均为国产分析纯。 　　1.2 仪器荧光检测仪 （型号：FP-6500，Jasco公司）；台式高速冷冻离心机（型号: Biofuge prime， R Heraeus公司） ；ALPHA1-4型冷冻干燥机（CHRIST公司）；数显恒温水浴