超临界二氧化碳萃取灵芝总三萜工艺探究.docVIP

超临界二氧化碳萃取灵芝总三萜工艺探究 　 作者：杨军, 余德顺, 罗俊, 罗喜荣 【摘要】 　　目的　探讨超临界CO2萃取灵芝总三萜的优化工艺条件。方法采用响应曲面法考察萃取压力、萃取温度、夹带剂用量对灵芝总三萜萃取率的影响。结果优化萃取条件为：萃取压力30 MPa，萃取温度51℃，夹带剂用量2.2 ml/g。结论该方法简便准确，预测性好。 【关键词】 灵芝; 总三萜; 超临界二氧化碳萃取; 响应曲面法 　　Abstract:ObjectiveTo investigate the optimum extraction of total triterpenoids from Ganoderma lucidum by supercritical carbon dioxide extraction．MethodsThe response surface methodology was applied in the analysis of extraction parameters such as extraction pressure，extraction temperature and entainer dosage.ResultsThe optimal extraction conditions were extraction pressure 30MPa, extraction temperature 51℃, entainer dosage 2.2 ml/g.ConclusionThe response surface methodology used in this study is able to predict the optimal extraction conditions for the total yield of total triterpenoids in Ganoderma lucidum. 　　Key words:Ganoderma lucidum; Total triterpenoids; Supercritical CO2 extraction; Response surface methodology 　　灵芝(Ganoderma)为层菌纲非褶菌目灵芝菌科灵芝属真菌的总称。习惯所称灵芝是指灵芝属中赤芝Ganoderma lucidum (Leyss.Ex Fr.)Karst.的子实体部分，其主要成分之一是三萜类化合物，由赤芝中发现的三萜类化合物已有135种，如赤芝酸A，赤芝酸B，灵芝酸A，灵芝酸B等［1］。该类化合物有较高的脂溶性，分子量一般为400～600，化学结构较复杂，目前已知有7种不同的母核结构，在母核上有多个不同的取代基，常见有羧基、羟基、酮基、甲基、乙酰基和甲氧基等。由于化学结构的多样性，使灵芝三萜类化合物具有抗肿瘤、抗HIV-1及HIV-1蛋白酶活性、抗氧化、抑制组胺释放、抑制胆固醇合成、抑制血小板聚集、保肝、镇痛等较广泛的药理活性［2］。 目前国内市场上灵芝药品、保健品种类繁多，很多灵芝产品以总三萜作为标志性功效成分。灵芝三萜类化合物不仅是当前灵芝化学及药理研究的热点，而且具有较好的工业应用前景。灵芝总三萜的提取分离一般采用甲醇或乙醇浸提，粗提物用氯仿溶解经碱处理分出总酸部分后再用氯仿萃取分离得到，但该方法存在耗时耗能、溶剂用量大、有溶剂残留、生产成本高等缺点［3,4］。超临界CO2萃取技术具有步骤简单、选择分离效果好、提取率高、产物无溶剂残留、有利于脂溶性物质和热敏性物质的萃取等优点，已被广泛应用于香料及中草药成分的提取。本文采用Box-Behnken响应曲面法对超临界CO2萃取灵芝总三萜工艺进行优化，寻找最佳工艺条件，为进一步规模化提取灵芝总三萜奠定基础。 　　1 材料与仪器 赤芝购于贵州省药材公司，破碎成10～20目颗粒备用；熊果酸标准品购于中国药品生物制品检定所；4L超临界萃取装置（自行研制）；T6新世纪紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；所用化学试剂均为分析纯。 　　2 方法 　　2.1 灵芝总三萜的提取采用Box-Behnken响应曲面设计法，以萃取压力、萃取温度、夹带剂用量〔夹带剂体积(ml)/灵芝原料重量(g)〕为自变量，以灵芝总三萜萃取率为响应指标设计三因素三水平实验方案，实验因素编码及水平设计见表1。表1 实验因素编码及水平（略） 取赤芝粉200 g置于超临界萃取器，设定萃取时间为1 h，CO2流量为20 L/h,解析压力为5 MPa，解析温度为60℃。当达到预定温压条件，启动夹带剂泵，定量打入95%乙醇，萃取过程中从解析器收集萃取液，实验结束后减压回收乙醇，真空干燥得红褐色固体。 　　2.2 灵芝总三萜含量的测定采用分光光度法［4