载雄激素受体三螺旋形成寡核苷酸ＰＥＧ-ＰＬＧＡ纳米粒子制备.docVIP

载雄激素受体三螺旋形成寡核苷酸ＰＥＧ-ＰＬＧＡ纳米粒子制备 　【摘要】 以生物可降解材料聚乙二醇-聚乳酸聚乙醇酸共聚物（ＰＥＧ-ＰＬＧＡ）制备载雄激素受体三螺旋形成寡核苷酸的纳米粒子（ＴＦＯ-ＮＰｓ），并初步探讨其对前列腺癌ＬＮＣａＰ细胞的生长抑制作用。 【方法】 采用改良自乳化溶剂挥发法（ｍｏｄｉｆｉｅｄ-ＳＥＳＤ）制备ＴＦＯ-ＮＰｓ，对其形态、包封率、载药量及体外释放特点进行鉴定。倒置荧光显微镜观察ＬＮＣａＰ细胞对ＴＦＯ-ＮＰｓ的摄取情况，四唑盐（ＭＴＴ）法测定体外细胞毒作用。 【结果】 制备的ＴＦＯ-ＮＰｓ呈球形、大小均匀，平均粒径１２８ ｎｍ，平均包封率和载药量分别为７２．２８％和１．０２％，在体外具有缓释作用。ＬＮＣａＰ细胞对ＴＦＯ-ＮＰｓ的摄取率显著高于裸ＴＦＯ。ＴＦＯ-ＮＰｓ对ＬＮＣａＰ细胞的抑制作用明显强于裸ＴＦＯ（Ｐ ＜ ０．０５），抑制率分别为６１．２％ ± ６．５％和２０．７％ ± ３．１％。 【结论】 本法制备的ＴＦＯ-ＮＰｓ理化性质优良，在体外能够有效抑制ＬＮＣａＰ细胞的增殖。 【关键词】 聚乙二醇-聚乳酸聚乙醇酸共聚 改良自乳化溶剂挥发法 纳米粒 三螺旋形成寡聚核苷酸 前列腺癌 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： 【Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ】 Ｔｏ ｐｒｅｐａｒｅ ａｎｄｒｏｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｇｅｎｅ ＴＦＯ ｌｏａｄｅｄ ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ （ＴＦＯ-ＮＰｓ） ｗｉｔｈ ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ ｍａｔｅｒｉａｌ ｐｏｌｙ （ｅｔｈｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ）-ｐｏｌｙ （ｌａｃｔｉｄｅ-ｃｏ-ｇｌｙｃｏｌｉｄｅ） （ＰＥＧ-ＰＬＧＡ） ａｎｄ ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅｉｒ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ＬＮＣａＰ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ． 【Ｍｅｔｈｏｄｓ】 ＴＦＯ-ＮＰｓ ｗｅｒｅ ｐｒｅｐａｒｅｄ ｂｙ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ ｅｍｕｌｓｉｏｎ ｓｏｌｖｅｎｔ ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ （ｍｏｄｉｆｉｅｄ-ＳＥＳＤ）． Ｔｈｅｎ ｔｈｅｉｒ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ， ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ ｒａｔｅ， ｄｒｕｇ ｌｏａｄｉｎｇ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ａｎｄ ｄｒｕｇ ｒｅｌｅａｓｅｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ． Ｔｈｅ ｕｐｔａｋｅ ｏｆ ＴＦＯ-ＮＰｓ ｂｙ ＬＮＣａＰ ｃｅｌｌｓ ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｂｙ ａｎ ｉｎｖｅｒｔｅｄ ｆｌｏｒｅｓｃｅｎｔ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ， ａｎｄ ｔｈｅ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ ｔｏ ＬＮＣａＰ ｃｅｌｌｓ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ＭＴＴ ａｓｓａｙ． 【Ｒｅｓｕｌｔｓ】 Ｔｈｅ ＴＦＯ-ＮＰｓ ｗｅｒｅ ｓｐｈｅｒｉｃａｌ， ｕｎｉｆｏｒｍ， ｗｉｔｈ ｍｅａｎ ｄｉａｍｅｔｅｒ ｏｆ １２８ ｎｍ． Ｔｈｅｉｒ ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ａｎｄ ｄｒｕｇ ｌｏａｄｉｎｇ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ｏｆ ＴＦＯ-ＮＰｓ ｗｅｒｅ ７２．２８％ ａｎｄ １．０２％， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｔｈｅ ｒｅｌｅａｓｅ ｔｅｓｔ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｓｈｏｗｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｓｕｓｔａｉｎｅｄ ｒｅｌｅａｓｅ． Ｔｈｅ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｕｐｔａｋｅ ｒａｔｅ ｏｆ ＴＦＯ-ＮＰｓ ｗａｓ ｍａｒｋｅｄｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｎａｋｅｄ ＴＦＯ． Ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ＬＮＣａＰ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ＴＦＯ-ＮＰｓ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｏｂｖｉｏｕｓ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｎａｋｅｄ ＴＦＯ（Ｐ ＜ ０．０５）， ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｒａｔｅｓ ｗｅｒｅ ６１．２％ ± ６．５％ ａｎｄ ２０．７％ ± ３．１％， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． 【Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ】 Ｔｈｅ ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ＴＦＯ-ＮＰｓ ｐｒｅｐａｒｅｄ ｂｙ ｍｏｄｉｆｉｅｄ-ＳＥＳＤ ｍｅｔｈｏｄ ａｒｅ ｅｘｃｅｌｌｅｎｔ． ＴＦＯ-ＮＰｓ ｃａｎ ｉｎｈｉｂｉｔ ＬＮＣａＰ ｃｅｌｌｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔｌｙ ｉｎ ｖｉｔｒｏ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ＰＥＧ-ＰＬＧＡ； ｍｏｄｉｆｉｅｄ-ＳＥＳＤ； ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ； ｔｒｉｐｌｅｘ-ｆｏｒｍｉｎｇ ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ； ｐｒｏｓｔａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ 　　纳米药物载体的构建是抗肿瘤研究中的一个热点［１，２］。作为基因药物载体，纳米粒子具有生物安全性好、稳定性强、转染效率高、作用时间长等优点。聚乳酸－聚乙醇酸