通便茶质量标准问题及策略.docVIP

通便茶质量标准问题及策略 　　通便茶为本院研制的纯中药袋泡剂，由大黄、黄芩、枳壳、甘草等组成，具有缓泻通便作用，用于肠胃燥热致大便秘结等症。为有效控制该制剂的质量，笔者采用薄层色谱法对通便茶中所含主要成分大黄、黄芩、枳壳进行定性鉴别，采用高效液相色谱法（HPLC）测定制剂中大黄素、大黄酸的含量，现报道如下。 　1 仪器与试药 　Waters2695高效液相色谱仪，Waters2998二极管阵列检测器（美国Waters）；分析天平（Shimadzu Aux220，日本岛津）；超声波清洗器（SCQ-250，上海声浦超声波设备厂）；硅胶G板（青岛海洋化工厂分厂）；玻璃点样毛细管（华西医科大学仪器厂）。 　大黄、黄芩、枳壳对照药材（批号分别为120902-200408、120955-200010、121008-200505，中国药品生物制品检定所）；大黄素、大黄酸、黄芩苷、柚皮苷对照品（批号分别为110756- 200110、110757-200206、110715-201011、110722-200610，中国药品生物制品检定所）；通便茶（批号分别2013033020130402201304042013040620130409，本院制剂室制备）；甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。 　2 薄层鉴别 　2.1 大黄 　取本品粉末0.2 g，加甲醇2 mL，超声处理（功率180 W，频率38 kHz）1 h，滤过，滤液蒸干，然后加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材0.1 g，加甲醇20 mL，同法制成对照药材溶液。再取大黄素对照品，加甲醇制成1 mg/mL的溶液，作为对照品溶液。按处方量取除大黄外其余药味，按工艺要求制成缺大黄的样品，按供试品溶液制备方法，制备阴性对照溶液。照薄层色谱法[2010年版《中华人民共和国药典》（一部）附录ⅥB]试验，吸取上述溶液各5 ?L，分别点于同一硅胶G薄层板上。以水饱和的苯-甲酸乙酯-甲酸-甲醇（3∶3∶1∶1）为展开剂展开，展距10 cm，置紫外灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，与对照品和对照药材色谱相应位置上可见橙红色荧光斑点，置氨气中熏蒸后，日光下检视，斑点变为红色。阴性对照无干扰。 　2.2 黄芩 　取本品粉末0.2 g，加甲醇2 mL，超声处理（功率180 W，频率38 kHz）1 h，滤过，滤液蒸干，然后加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。取黄芩对照药材5 g、黄芩阴性对照样品10 g，同法制成对照药材溶液和阴性对照溶液。再取黄芩苷对照品加甲醇制成0.1 mg/mL的对照品溶液。照薄层色谱法[2010年版《中华人民共和国药典》（一部）附录ⅥB]试验，吸取上述溶液各5 ?L，分别点于同一硅胶G薄层板上。以乙酸乙酯-丁酮-乙酸-水（10∶7∶2∶2）为展开剂，展开，取出，吹干，喷以2%三氯化铁乙醇液。供试品色谱中，与对照品色谱相应位置上显相同的墨绿色斑点，与对照药材色谱相应位置上显相同颜色的斑点，阴性对照无相应斑点。 　2.3 枳壳 　取本品5 g，加甲醇25 mL，超声处理（功率180 W，频率38 kHz） 1 h，滤过，滤液蒸干，残渣加10 mL水，用乙醚振摇提取3次，每次15 mL，弃去乙醚液，蒸馏回收乙醚，再用乙酸乙酯振摇提取3次，每次20 mL，合并乙酸乙酯液（水层备用），蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取枳壳对照药材0.5 g，加甲醇20 mL，同法制成对照药材溶液。再取柚皮苷对照品，加甲醇制成1 mg/mL的对照品溶液。按处方量取除枳壳外其余药味，按工艺要求制成缺枳壳的样品，按供试品溶液制备方法，制备阴性对照溶液。照薄层色谱法[2010年版《中华人民共和国药典》（一部）附录ⅥB]试验，吸取上述4种溶液各5 ?L，分别点于同一硅胶G薄层板上。以三氯甲烷-甲醇-冰醋酸（10∶2∶0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铝乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无相应斑点。 　3 含量测定 　3.1 色谱条件 　色谱柱：SunFire C18（4.6 mmtimes;250 mm，5 ?m）；流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液（85∶15）；检测波长：254 nm；流速：1.0 mL/min；进样量：10 ?L；柱温：30 ℃。色谱图见图1。 　3.2 对照品溶液的制备 　精密称取大黄酸、大黄素对照品适量，加甲醇分别制成每1 mL含大黄酸11 ?g、大黄素112 ?g的溶液。 　3.3 供试品溶液的制备 　取本品适量，研细，取约1 g，精密称定，置具塞