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CYP450在SAP组织中表达及对临床治疗指导意义 　【摘要】 目的：研究急性重症胰腺炎(SAP)模型中CYP450(细胞色素P450)在组织中的表达及对临床治疗的指导意义。方法：以3％牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射制备鼠SAP模型，检测血清淀粉酶，采用免疫组织化学方法分别对雄性SD大鼠SAP制备模型术后4 h、12 h及正常对照组标本中CYP450的表达进行检测。结果：CYP450主要表达于胞浆，SAP模型组空肠、肝脏组织中的CYP450表达均明显高于正常对照组(P＜0.001)。结论：CYP450在大鼠SAP中表达显著增强，提示其在SAP的疾病发展及临床治疗中都具有重要意义。 【关键词】 细胞色素P450 急性重症胰腺炎 肝脏 空肠 Abstract Objective：To investigate the dynamic expression of hepatic cytochrome P450(CYP450)in early severe acute pancreatitis(SAP).Methods：SAP was induced by retrograde injection of 3％sodium taurocholate into the bilipancreatic duct，the activity of serum amylase was investigated.Immunity histochemistry method was used for detecting MCP1 expression in model of SAP 4 h，12 h and normal control ones in male rats.Results：CYP450 is fundamental expressed in endochylema.The expression of CYP450 which in tissues of jejunum，liver are conspicuous higher than the normal control ones.Conclusion：It seemed that CYP450 plays a pivotal role in the development and clinical treatment of SAP. Key words cytochrome P450；severe acute pancreatitis；liver；jejunum 近年来，随着人民生活水平的提高及生活饮食习惯的改变，急性胰腺炎的发病率呈明显上升趋势。急性重症胰腺炎(SAP)的确切发病机制尚未完全阐明，近年来的研究表明，CYP450(平均积分光密度)可能在SAP发病过程中有着重要作用。本研究采用牛黄胆酸钠制备大鼠SAP模型，通过观察肝脏及空肠组织中细胞色素P450蛋白的表达情况，并结合肝功能，拟系统探讨细胞色素P450的表达在SAP发生中的地位及其可能机制，以期进一步探明SAP的发病机制，并为临床干预提供重要线索。 1 资料与方法 1.1 一般资料 健康雄性SD大鼠，清洁级，体重250～300 g，由河北医科大学实验动物中心提供。CYP450单克隆抗体由北京博奥森生物工程有限公司提供，免疫组织化学试剂盒由山西医科大学寄生虫教研室提供。 1.2 动物模型的制备及分组 30只大鼠，随机分为3组，每组10只。假手术组(SO组)；SAP 4 h组；SAP 12 h组。其中假手术组直接手术取出相应组织。模型制作简要步骤：大鼠术前禁食禁水12 h，3％戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔内注射麻醉后，仰卧位固定于无菌手术台，消毒腹部皮肤，正中切口入腹，沿胃窦向下首先找到十二指肠，在其内侧见片状分布的胰腺组织及半透明的胰胆管汇入十二指肠乳头。肝门部胆管动脉夹夹闭后，从胆胰管开口十二指肠对系膜缘侧穿刺肠壁进入胆胰管开口后，于十二指肠乳头处用手指捏闭胆总管末端。经微量注射泵缓慢匀速(18 mL/h)注入3％牛磺胆酸钠(1 mL/kg)，注射时间1 min。5 min后去除动脉夹，局部压迫肠壁穿刺处，双层关腹。造模后所有动物均皮下注射生理盐水5 mL，以补充血容量不足。 1.3 血清淀粉酶检测 在各时间点处死大鼠，迅速入腹抽取下腔静脉血，分离血清，用于脂肪酶及淀粉酶测定。 1.4 表达测定 分别取三组大鼠的肝脏、空肠组织，置4％多聚甲醛中固定，石蜡包埋，行4 μm厚全层切片及HE染色，并采用免疫组织化学法检测肝脏、空肠组织中CYP450的表达。各组织切片常规二甲苯脱蜡，梯度乙醇水化后滴加3％H2O2溶液10 min(去除内源性过氧化氢酶活性)，修复抗原(高压修复)，自然冷却至室温后依次按说