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毕业设计开题报告
课题名称: 500吨/年丝氨酸发酵车间的设计
班 级: 生工1002
学 号: 1032050224
姓 名: 韩宁
指导教师: 王菲
年 月 日
一、文献综述
1丝氨酸的概况
1.1丝氨酸的基本性质
L-丝氨酸(L-serine;简写 L-ser),分子式为C3H7NO3,化学结构为HO-CH2CH(NH3)-COOH,分子量105.10,化学名为α-氨基-β-羟基丙酸。L-丝氨酸是一种含羟基的中性氨基酸,为白色六角棱柱状晶体或结晶性粉末,比热容为1.209 J/g℃,摩尔热容为135.65 J/mol℃,熔点为 223~228℃,易溶于水和甲酸,不溶于乙醇和乙醚,呈甜味。比旋光度[α] = +14.4+15.5°。不同基团在25℃时的解离常数pK1(COOH) = 2.21,pK2(NH4) = 9.15pI= 5.68[1]。
1.2丝氨酸的作用
L-丝氨酸虽属于非必需氨基酸但具有许多重要的生理功能和作用,因此,在医药、食品、化妆品中均有较为广泛的应用。
(1)L-丝氨酸在医药方面具有以下功能和作用:
①合成嗓吟、胸腺嚓陡、胆碱的前体;
②L-丝氨酸经基经磷酸化作用后能衍生出具重要生理功能的磷丝氨酸,是磷脂主要成分之一;
③丝氨酸的衍生物环丝氨酸是一种抗生素,可用于治疗结核病;偶氮丝氨酸是一种抗癌剂,常用于治疗肿瘤;同时,偶氮丝氨酸作为谷氨酞胺的抗代谢物,可用于治疗急性 白血病和柯杰金氏病;
④具有稳定滴眼液pH值的作用,且滴眼后无刺激性。因此,L-丝氨酸主要应用于医 药行业,表1列出了一些需要L-丝氨酸的氨基酸输液和要素膳配方。
丝氨酸是重要的自然保湿因子(NMF)之一,皮肤角质层保持水分的主要角色,因此是很多高级化妆品中的关键添加剂,只是因其价格限制了它在化妆品中的应用。
(2)(3)(4)Mailard )反应和斯特勒克(Strecker)降解反应。将一份丝氨酸和一份葡萄糖所组成的混合物在10 ℃下加热,通过斯特勒克降解反应生成2-轻基乙醛,使混合物具有枫糖浆的香味特征[2,3]。
1.3丝氨酸的检测
1958 年Spackman 等首次报道了氨基酸自动分析方法。经过40多年的发展,氨基酸分析方法得到不断的改进和完善,由最初的阳离子交换色谱分离柱后茚三酮衍生化方法发展为多种分析方法并存,互相取长补短。这些方法可以归纳为两类: 一、衍生化间接分析法,包括衍生化离子交换色谱法、衍生化高效液相色谱法、衍生化气相色谱法和衍生化毛细管电泳法;二、无需衍生化的直接分析法,主要指高效阴离子交换色谱积分脉冲安培法(HPAEC-I-PAD)。
1.3.1衍生化间接分析法[4]
衍生化间接法是将氨基酸衍生为有利于测定或分离的化合物。大多数氨基酸不含有芳香环等生色团,无法直接用紫外法检测,需要先将氨基酸衍生为具有较强紫外或荧光吸收的衍生物。在气相色谱法中,由于氨基酸含有羟基、羧基和氨基等极性基团,不易挥发,因此需要将其衍生为易挥发的非极性化合物以便于分离。主要有衍生化离子交换色谱法、衍生化高效液相色谱法[5]、衍生化毛细管电泳法、柱前衍生化气相色谱法
1.3.2氨基酸直接分析法阴离子交换色谱积分脉冲安培法。
氨基酸直接分析法无需对氨基酸进行衍生化,可直接对氨基酸进行分离测定。1999年Clarke等采用阴离子交换色谱积分脉冲安培法直接对蛋白水解液中的氨基酸进行分析,成功地测定了22种基本氨基酸,检出限达到pmol水平,分析结果与茚三酮法一致。该法的基本原理是利用氨基酸在碱性流动液中的羧基阴离子在阴离子交换树脂上的保留进行分离;在pH12 的溶液中,伯胺和仲胺化合物能够在金电极上被氧化,采用积分脉冲安培法检测。Cheng 等使用一次性金电极分析氨基酸,克服了金电极容易污染的缺点[6,7]。
1.4丝氨酸的生产工艺
由于L-丝氨酸处于代谢途径的中间位置,代谢速度快,生产困难,不易进行大规模生产。目前,L-丝氨酸的生产方法主要有蛋白质水解法、化学合成法、发酵法和酶法。蛋白质水解法生产L-丝氨酸存在很多问题,具体表现在:第一,水解过程中存在消旋作用,步骤繁琐,L-丝氨酸的损失率高;第二,所得的氨基酸常为混合氨基酸,还需进一步分离、精制,污染较大;第三,水解设备腐蚀严重;第四,需大量的洗脱液,污染严重。化学法可采用不同的化学原料,不同的工艺路线,生产规模大,产品易分离提纯。但化学合成法只能获得DL-丝氨酸,要得到L-丝氨酸还要进行化学拆分,增加了成本及其生产复杂性。由于发酵法和酶法克服了上述两种方法的缺
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