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江苏大学硕士论文
关键词: GlTRL,CD4+CD25+T细胞,
Foxp3,蛋白表达,多克隆
抗体,小鼠
lV
江苏大学硕士论文
onthef.unctionand
RolesofmGITItL Foxp3expression
ofmurineCD4+CD25+Tce¨s
ABSTRACT
ObjectiVe:
To theroleofmGlTRLonmurineCD4+CD25+Tcells觑
explore
’,ffrD.Toobtainlherecombinantmurine and rabbit
Foxp3proteinprepare
anti—mouse
Foxp3antibody.
Methods:
(1)GlTRLaa45.173were PCRfrom
genefragmentsamplifiedby
subclonedinto Vector.The
Vector,and pDisplay
GITRI广pET一32a
VectorwastransfbrmedintoE
mGITRI且a45.173-pDisplay cD厅上)_jj巧口,and
restriction andPCR cells
identified
by digesIion amplincation.HEK293
weretransfectedthe Vector
eukaryotic mGlTRL,aa45.173-
by expression
medialionof 48hours
inthe culture,culture
pDisplay liposome.Ajfter
were wasdetected
collected,and
supematants targetprolein by
identifiedWesternblot.
SDS—PAGEand by
CD4+CD25+TcellsandCD4+CD25’Tcellswere
(2)Mouse
splenic
isolated the andG11R ofCD4+CD25+T
MACS,and
by purity expression
cell FCM.TherecombinantmGITRLwas
swere
analyzedby
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