东北师范大学生物化学第十二章核酸的生物合成1.ppt

转录起点 3/ 反意链（- 模） 5/ 上游（—） 下游（+） 5/ -1 +1 有意链（+ 编） 3/ mRNA 序列互补于反意链，与有意链相同 病毒RNA复制的主要方式 1、正链RNA病毒（mRNA）：噬菌体Qβ、灰质炎病毒等。 进入寄主细胞后，利用寄主的翻译系统，首先合成复制酶及有关的蛋白质，然后进行病毒RNA的复制，最后由病毒RNA和蛋白质装配成病毒颗粒。 ? 2、负链RNA病毒（带有复制酶）：狂犬病毒等 此类病毒带有复制酶，侵入后，复制酶首先合成出正链RNA（mRNA），再以正链RNA为模板，合成负链RNA及蛋白质，然后装配。 3 双链RNA病毒（带有复制酶）：呼肠孤病毒等 以双链RNA为模板，在复制酶作用下先转录正链RNA（mRNA），从而翻译出蛋白质，然后合成负链RNA，形成双链RNA，再包装。 4 反转录病毒（又名致癌RNA病毒，含反转录酶）：白血病病毒、肉瘤病毒等致癌RNA病毒 正链RNA病毒，它们的复制需要经过DNA前病毒阶段。 ? 不同RNA病毒合成mRNA的途径可以分4类： Cap 0 Cap 1 Cap 2 甲基来自SAM 5’末端有帽子结构的意义： 核糖体识别mRNA的信号 翻译起始必需的结构 增加mRNA的稳定性，保护mRNA 生物进化程度越高,帽子结果越复杂 3′加Poly A尾 可能与mRNA从细胞核转运至细胞质有关 拼接 套锁拼接 依赖snRNPs的拼接 （2）rRNA前体的转录后加工 （3）tRNA前体的加工 （1）转录是不对称转录 转录只能以一条链为模板，而复制是两条链都能做模板 （2）转录具有选择性 根据细胞的实际需求，特定的基因或者开放或者关闭；而DNA的复制是全序列的复制 （3）转录时不需要引物，而且RNA链的合成是连续的 DNA复制需要引物，后随链不连续合成 6 转录和复制的区别 （5）转录后有一个复杂的后加工处理过程 （4）转录后DNA保持双链结构，复制后形成两个子代DNA分子 （二）RNA的复制 RNA复制酶（RNA指导的RNA聚合酶）： 模板特异性很高 5→3方向合成互补的RNA分子 缺乏校正功能 （四） 真核细胞DNA的复制 1 真核细胞DNA复制有多个起始点。 2 至少有5种DNA聚合酶，即α、β、γ、δ 、ε 。 3 端粒由端粒酶催化复制。 (五） 反转录作用 1970年Temin和Baltimore同时从RNA病毒中发现反转录酶。 利用反转录酶可制造与任何RNA（mRNA、tRNA、rRNA）的互补DNA（cDNA）。 携带反转录酶的病毒又称为反转录病毒 反转录酶大多具有多种酶活性 RNA指导的DNA聚合酶活性： RNase H水解酶活性（ 5′→3′） DNA指导的DNA聚合酶活性 tRNA为引物，多为色氨酸的tRNA 5′→3′聚合酶活性 无3′→5′外切酶活性 反转录的生物学意义： 对Crick中心法则是一种补充和发展(DNA RNA) 有利于RNA病毒致癌机制的了解 指导肿瘤的防治和药物设计 在基因工程上应用广泛(cDNA文库的构建) Human Immune Deficiency Virus HIV （六） DNA的损伤与修复 ①光复活 ②切除修复 ③重组修复 ④SOS修复 5′—G—A—A—T—T—C—3′ 3′—C—T—T—A—A—G—5′ 5′—G T—T—A—A—C—3′ 3′—C—A—A—T—T G—5′ 粘性末端(该末端能与具有互补碱基的目的基因的DNA片段连结 ) EcoRⅠ （七） 细菌的限制—修饰系统 限制性内切酶 限制性内切酶和核酸修饰酶共同作用， 保护自身的DNA 限制性内切酶： 识别DNA特定核苷酸序列 回文序列 重要的生物化学工具酶 （八） 基因重组与DNA“克隆” （九） 聚合酶链式反应（PCR）技术与DNA扩增 二 RNA的生物合成 （一）RNA的种类 RNA mRNA（5%） tR