IGFBP-6及晚期鼻咽癌患者预后关系以及在鼻咽癌细胞增殖转移和骨质破坏过程中作用和机理.pdfVIP

IGFBP-6与晚期鼻咽癌患者预后的灭系以及在鼻咽癌细胞增殖转移和骨质破坏过程中的作用和机理 第三章 IGFBP．6对破骨细胞的形成及鼻咽癌骨质破坏的影响 目的： 体外实验检测IGFBP．6对破骨细胞形成的影响；体内实验探讨IGFBP．6基 因干扰后对鼻咽癌细胞的骨质破坏能力的影响。 方法： DMEM培养液促进破骨细胞的成熟，并同时加予不同浓度的IGFBP．6，诱导6 天后，形成成熟破骨细胞，行破骨细胞TRAP染色。小鼠骨髓细胞分离，用含有 Medium)、 胞TRAP染色。 实验动物分三组，每组5只免疫缺陷小鼠。分别在小鼠右侧胫骨骨髓腔注 3hRNA以及HK—l三种肿瘤细胞。细胞的浓度 射CNE2、稳定转染CNE2．IGFBP．6 调整为l 后，继续饲养并密切观察小鼠的生长状态，4周后将小鼠处死，处死前全身骨x 片照射。解CUd,鼠，暴露内脏各器官，观察肿瘤的生长与转移情况，照相，并进 行病理取材。病理取材标本直接置10％福尔马林溶液固定，经处理后，石蜡包 埋组织块，病理切片，HE染色，光学显微镜观察，病理玻片TRAP染色。 结果： 了破骨细胞的形成(氏0．05)，这种作用与和CNE2．CM共培养是相似的，它们 的这种作用能够被IGFBP一6的抗体所抑制。 一VI— IGFBP-6与晚期鼻咽癌患者颅后的火系以及在鼻咽癌细胞增殖转移和骨质破坏过程中的作用和机理 右侧胫骨注射4周后，通过X～ray及病理标本HE及TRAP染色，结果显示抑 制IGFBP．6的表达能够减少肿瘤细胞引起的骨质破坏及破骨细胞的形成(P 0．05)。将鼻咽高分化鳞癌HK．1细胞进行小鼠(5只)右侧胫骨骨髓腔注射4周后， 通过X—ray及病理标本HE染色，结果显示没有小鼠发生明显的骨质破坏。 结论： 体外细胞实验显示IGFBP．6能够诱导破骨细胞的形成，体内动物实验显示 IGFBP．6基因干扰后能够在一定程度上抑制鼻咽癌细胞珠CNE2引起的骨质破坏 及破骨细胞形成的能力。 全文结论 1．鼻咽癌组织中IGFBP．6有不同程度的表达，IGFBP．6的表达是鼻咽癌患者局 部区域复发及远处转移风险有关的因素，其阳性表达提示患者局部区域复发 及远处转移风险降低。 2．鼻咽癌细胞珠CNE2和HK．1均高表达IGFBP．6mRNA。体外实验证明 基因干扰后能够促进鼻咽癌细胞CNE2的远处器官转移。 3．IGFBP．6能够诱导破骨细胞的形成，IGFBP一6基因干扰后能够抑制鼻咽癌细 胞珠CNE2引起的骨质破坏及破骨细胞形成的能力。 关键词：鼻咽癌；IGFBP．6；预后；增殖；转移 一VII— IGFBP一6与晚期鼻咽癌患者预后的关系以及在鼻咽癌细胞增殖转移和骨质破坏过挥中的作厂仃和机理 IGFBP一6and ofadvanced The of relationship prognosis mechanismintheNPC NPC andthefunctionand patients ofbone cell andmetastasisanddestruction proliferation Major Oncoiogy Ph．DCandidateChen Qiu—yah SupervisorHongMing-huang ABSTRACT and