外源物质对不同倍性白花泡桐体外植株再生及幼苗蛋白质变化的影响的研究.pdfVIP

1文献综述 泡桐是我国一种重要的速生用材树种和庭院绿化树种之一，主要分布于北纬20。-一50。， 东经98。～125‘之间，在中国的23个省、市、自治区都有分布，近年来在世界其他地区也 有引种。泡桐具有生长快，材质优良，适合农桐间作等优点，深受广大群众的喜爱。大量种 植泡桐对缓解我国木材短缺、改善生态环境、增加农民收入、提高人民生活水平等具有重要 的生态意义、经济意义和社会意义。DNA甲基和组蛋白的修饰参与基因表达的调控，在植 物生长发育过程中起着非常重要的作用。 1．1植物DNA的甲基化及其生物学意义 1．1．1植物DNA甲基化及其特点 DNA甲基化(DNA 腺苷一甲硫氨酸(S-adomet，S埘)上的甲基基团连接到DNA分子的腺嘌呤碱基或胞嘧啶碱基 RLP，BurdonRH，1982)。它是活体细胞中最常见的一 上，进行DNA修饰的过程(Adams 种DNA共价修饰形式，通常发生在胞嘧啶或腺嘌呤上，是生物界普遍存在的一种现象。在 高等植物中，DNA中被甲基化的碱基一般是c(胞嘧啶)。植物DNA甲基化研究起步晚，研 菜和菜心(李梅兰等，2002a，b)等农作物。 a1．， 不同植物DNA甲基化水平不同，如拟南芥(Burn，eta1．，1993)、白芥(Wanger，et a1．，1981；Horvath，etaL，2003)、 1981)、番茄(Messegure，eta1．，1991)、小麦(Wanger，et 豌豆(Wanger，eta1．，1981)、烟草(Wanger，eta1．，1981)、菜心(李梅兰，2001)、油菜(陆光 12．20％， 远等2005)、泡桐(范国强，2008)等植物，其DNA甲基化水平分别为34．20％， 23％， 15．33％，23．20％，32．60％、26．34％、15．7％和48％。 同一物种不同时期及不同组织中甲基化水平的差异也很大。陆光远等(2005)发现， 在油菜种子萌发过程中CCGG位点甲基化状态发生改变，不同的组织中甲基化水平不同； 仪治本等(2005b)研究表明，玉米杂交种的甲基化程度高于或与其双亲的程度相当，说明 发育过程；Xiong等(1999)研究表明同一植物不同组织的DNA甲基化模式不同；张红宇 (2006)研究结果表明，水稻单倍体甲基化变异具有位点特异性，某些位点更倾向于变异； 彭海(2006)发现二倍体的甲基化水平比三倍体的低，且甲基化水平更稳定。另外，范国强 等(2008)研究表明健康泡桐幼苗远比患丛枝病泡桐幼苗的甲基化水高。 1．1．2 DNA甲基化抑制剂及其作用机理 DNA甲基化抑制剂是一类能使基冈组甲基化水平降低的碱基类似物，主要包括5-Aza、 2 甲基化酶与胞嘧啶的第6位碳共价结合，从SAM上转移甲基基团到胞嘧啶的第5位之后， 中嘧啶环的第5位是N，因而不能接受甲基，当甲基化酶与此嘧啶的第6位碳结后，SAM 上甲基便不能被酶转移到嘧啶环的第5位碳原子，甲基化酶也就不能脱离，致使含5-Aza 或5-Aza-cdR的DNA便与甲基化酶形成稳定的共价复合体。这样就导致甲基化酶的活性减 小，从而DNA甲基化受到抑制，基因组甲基化水平降低(Zakharov，AF，1972)。cdR的 毒性作用及不稳定性是该药使用受限的主要原因，最近发现的Zebularine和它相比毒性作用 小、结构稳定，可以低剂量长时间滴注，且可以与5-AzacdR产生协同作用。 1．1．3 DNA甲基化检测方法 随着对DNA甲基化研究的深入，DNA甲基化的测定方法也不断增多，这里介绍几种 使用相对较多的DNA的甲基化检测方法。 · 1．1．3．1高效液相色谱(HPLC)法测定甲基化 liquid 种方法误差小，结果准确，是目前测定基因组DNAqb5mC总量最标准的方法。其具体过