滋阴泻火方对雌性真性性早熟大鼠性腺轴及生长轴功能的影响实验的研究.pdfVIP

东南大学硕士论文 中医学同样也一直在探索性早熟的治疗。中医认为人的生长发育与“肾气”关系最为密切， 肾气充盈，儿童的生长发育正常。儿童营养失衡，后天培补太过、环境不良等因素可引起肾阴 阳平衡失调。小儿乃纯阳之体，阳常有余，阴常不足，在病理上多出现肾阴亏损相火过旺，这 被认为是临床出现真性性早熟的中医病理机制。基于此理论，中医常采用滋阴泻火中药用于治 疗性早熟。经临床和动物实验证实滋阴泻火方可以缓解下丘脑一垂体啦腺轴的功能亢进。消退 性征，而且还可抑制成骨细胞的过度亢进，减慢骨骼生长，延缓骨骼成熟，防止骨骺过早融合。 但有关中药对下丘脑一垂体一生长轴功能的影响尚有待探讨。 下丘脑一垂体一生长轴的功能状态是决定成年身高的主要因素，对性早熟的治疗必然会影响 生长轴的功能状态，中医也不例外。因此，了解中医治疗性早熟对生长轴的影响同样是非常重 要的，不仅可以为治疗价值的提供评价依据，而且可为临床调整治疗方案提供参考。 东南大学医学院中心实验室潘建等成功建立了真性性早熟动物模型【4J，用N一甲基一DL一天冬 氨酸(NMA)使雌性大鼠的阴道口提前开放。子宫、卵巢提前发育，卵巢黄体提前出现，Gn髓 和LH脉冲式分泌水平提前上升，阴道细胞涂片可见脱落细胞提前呈现规则性周期变化，大鼠阴 道口开放之日表现为动情期，随后相继进入动情后期、动情间期和动情前期，循环往复，每个 周期持续约4-5天，与正常进入青春期大鼠相似。 本实验拟召删A诱导的雌性大鼠真性性早熟的基础上，以大鼠阴道口开放和第一次捧卵的发 生作为判断雌性大鼠青春期启动的标准降6】，利用NMA促进大鼠青春期提前启动的作用，用滋阴 降火方的大、中、小剂量(中剂量相当于临床治疗性早熟儿童的剂量)，及GnRHa亮丙瑞林分别 进行干预。探讨滋阴降火方的干预机理、合适剂量以及影响生长的作用途径和机制。采用目前 timeRT 较为先进的实时荧光定量聚合酶链反应法(real Pcll)技术测定下丘脑Gn肼mRNA以及垂 体GH咄NA表达水平，放射免疫技术测定血IGF-I水平，光镜下观察卵巢黄体出现情况，计算卵 巢指数和子宫指数，采用外周骨定量计算机断层扫描仪(PQcr)测定大鼠胫骨骨密度。从整体、 组织和分子水平观察滋阴泻火方对雌性大鼠下丘脑一垂体一性腺轴以及下丘脑一垂体一生长轴功 能的影响，从动物、组织、基因水平验证其对大鼠真性性早熟的疗效，为进一步研究真性性早 熟的治疗，推广开发中药提供实验基础。 2 文献综述 文献综述 性发育早晚不同个体差别很大，而且受遗传、种族、地理、营养、经济、疾病等因素的影 响。近年来营养状况迅速改善，疾病减少，性发育的年龄显著提前。目前临床仍以1998年的 wilkinsOL童和青春期内分泌疾病的诊断与治疗》教科书(第4版)为标准川，将女孩8岁、男 孩9岁前出现性征发育诊断为性早熟。近年来本病的发生率显著增高，已成为最常见的小儿内分 泌疾病之一． 性早熟可分为：1、中枢性性早熟(centralprecociouspuberty，CPF)：亦称Gn跚依赖性 或真性性早熟，是指由于下丘脑一垂体一性腺轴功能提前激活，导致性腺发育和功能成熟，与正 常青春期发育成熟机制完全一致，并可具有一定的生育能力。中枢性性早熟主要包括中枢神经 系统各种器质性病变和特发性性早熟两大类。所谓特发性性早熟又可称为体制性性早熟，是指 经检查未发现患儿提前启动青春发育器质性病因的性早熟，此类型以女孩居多，亦是CPP中常见 的病因。2、外周性性早熟(peripheralprecociouspuberty)：亦称非Gn删依赖性或假性性 早熟，是非受控于下丘脑一垂体—性腺轴功能所致的性发育，有性激素水平的升高，并促使性征 提前发育，但无生育能力。3、部分性性早熟：单纯性乳房早发育、单纯性阴毛早发育、单纯性 早初潮阁。 导致ICPP发生的关键在于下丘脑一垂体一性腺轴提前启动，6nll}l脉冲发生器的活动性增强， 引起性腺类固醇激素分泌呈青春期改变，性腺发育，青春期提前发生，其性征发育顺序与正常 青春期一致。ICPP患儿下丘脑一垂体一生长轴也提前启动，GHRH、GH、IGF-I脉冲式分泌提前增 加，骨骼线性生长加速，出现骨骼生长突增，虽然与正常青春期相似，但骨成熟过快，