胚胎期及哺乳期高氟对发育甲状腺的影响及可能机制的研究.pdfVIP

贵阳中医学院硕I：学位论文 —▲￡．—1● 刖 百 氟中毒是一种全身性疾病，过量的摄入氟几乎对机体所有器官和组织均产生 毒害作用n1。有资料报道妲’，甲状腺是对氟最敏感的器官。影响甲状腺的最低氟 阈值为0．5mg／(kg．bw．d)。研究已经证实∞1：高氟能明显地影响甲状腺摄 取和聚集碘的能力，在此基础上影响整个甲状腺的结构和功能，造成甲状腺功能 低减、甲状腺形态结构损害。我们前期的实验结果也证实了此结论n1。 高氟不但可造成机体多方面的损害，还能够通过胎盘和乳汁进入胎儿体内直 接影响胎儿踌一1。胎儿甲状腺在妊娠70d开始碘浓缩及碘化酪氨酸合成，在妊娠 17周可见甲状腺腺体结构。妊娠期染氟可影响胎儿甲状腺的分化发育、甲状腺 激素的合成。目前有报道盯1氟病区胎儿甲状腺滤泡上皮细胞线粒体肿胀，严重者 甚至出现线粒体崩解；动物实验发现长期摄入高氟对胎鼠甲状腺发育有影响陋1。 还有报道指出一1，甲状腺在受到短期高氟作用后，脱离高氟的影响，甲状腺的功 能和形态可能恢复正常。但关于高氟对子代甲状腺功能及甲状腺形态结构的影响 相关报道尚少见。观察、研究子代脱离高氟环境生长发育至成年后，甲状腺的功 能和形念是否能够恢复正常，对指导氟中毒防治原则的确立和明确具体防治措施 都是重要的。 近年来，谷氨酸受体(Glutamate 织损伤中所扮演的重要角色越来越受到关注，其通过兴奋性毒性引发一系列的损 伤反应。已知谷氨酸受体在大多外周组织均存在，性腺、胰腺、垂体、松果体、 肾和肾上腺等内分泌组织也有GluRs分布u引。实验证明，GluRs无论在中枢神经 信息，在效应细胞引起特定的功能改变或电位变化。在内分泌组织GluRs可能参 与调节激素的分泌，介导激素的释放，从而对机体代谢及功能发挥调控作用[12]o 甲状腺是人体内最大的内分泌腺，甲状腺中是否存在GluRs，GluRs在高氟所致 的甲状腺组织中表达有无改变及可能的意义，目前国内外未见研究报道。而对此 展开研究显然也是有意义的，因为其可能构成氟中毒致组织损伤的重要机理。 贵田1中医学院硕l：学位论文 正 文 1．实验材料： 学院实验动物中心提供。 1．2主要实验试剂： 氟化钠(重庆试剂厂，分析纯) TT。、TT。试剂盒(北京原子能生物技术研究所) NR：B抗体(博士德公司) 生物素化山羊抗兔IgG(博士德公司) DAB显色剂(博士德公司) 1．3实验溶液的配制： 0．1M PBS缓冲液：1000ml双蒸水，加入Nacl189，Na：HP04·12H：0 129， NaH：PO,·2H：00．89，PH值7．2—7．4。 0．01M柠檬酸盐缓冲液：2000ml双蒸水，加入柠檬酸三钠3．Og，柠檬酸0．49， PH值6．O一6．2。 中性福尔马林固定液：40％甲醛lOOml，磷酸二氢钠3．59，磷酸氢二钠6．59， 加蒸馏水900ml，PH值7．0。 1．4主要实验器材： 精密电子天平(上海医用激光仪器厂) 101-2B型内热恒温鼓风干燥箱(上海路达实验仪器有限公司) LEICA切片机(RM2135德国) 奥林巴斯显微镜(BH2日本) Biomias2001图象分析系统(四川大学图象图形研究所) 2．方法与结果： 2．1动物分组： (F组)20只。两组大鼠分别雌雄交配产生子代大鼠，正常子代组为n组，高氟 6 贵阳中医学院硕I：学位论文 子代组为f组。 2．2造模方法： 大鼠于室温20C一25C喂养，实验前适应性喂养观察一周。正常亲代组(N 组)饮用自来水，高氟亲代组(F组)饮用含NaFlOOmg／L高氟水。7个月后随 机抽取高氟亲代组大鼠检测TT。、TT4，明确功能低减后，两组大鼠分别雌雄交配， 一月后产子代大鼠。哺乳期间母鼠继续饮用高氟水，30天后母鼠与子鼠分笼； 两组子代大鼠分笼后均饮用自来水，普通饲料喂养。待子代大鼠4月龄时杀鼠。 2．3样本取材： TT。测定。 (2)大