流式细胞术对1例白血病病例免疫表型分析.docVIP

流式细胞术对1例白血病病例免疫表型分析 　【关键词】 免疫表型 【摘要】 目的 探讨白血病免疫分型在临床诊断、治疗中的作用。方法 采用免疫荧光标记的方法，用流式细胞仪分析患者血细胞表面各种抗原标记物的表达情况。结果 形态学最初诊断为再生障碍性贫血（AA）的这例病例，经流式细胞术检测出有异常幼稚细胞群体的存在，两次的免疫表型分析显示异常细胞群体由最初的两群细胞克隆演变为一个克隆群体，并带有B细胞系列的抗原标记，临床最终诊断为急性淋巴细胞白血病。目前采用针对B系的化疗方案，疗效较显著。结论 流式细胞术的免疫表型分析对临床的诊断、治疗方案具有重要的参考价值。 　　【关键词】 免疫表型；流式细胞术 　　【Abstract】 Objective To evaluate the effect of flow cytometric immunophenotyping in clinic diagnosis and therapy.Methods Treated with fluorescein-conjugate antibody, expression of antigen from bone marrow cells was analysed by flow cytometry. Results This case originally diagnosed as AA by morphologic method was discovered to have lots of blasts by flow cytometry. Through two times immunophenotyping analysis, two abnormal colonies developed a colony with B cell antigen. The case was finally diagnosed as ALL and treated with chemotherapy and having a good curative effect. Conclusion Immunophenotyping of flow cytometry have important reference effect on clinic diagnosis and therapy. 　　【Key words】 immunophenotyping；flow cytometry 　　流式细胞术的免疫表型分析在血液系统疾病领域越来越受到人们的重视，流式所提供的信息对临床的诊疗具有重要的参考价值，现将此病例的免疫表型分析报告如下。 　　1 临床资料 　　1.1 一般资料 患者，男，57岁，面色苍白，呈贫血貌，形态学最初诊断为再生障碍性贫血（AA）。 　　1.2 抗体 CD45PC5、CD3FITC/CD16+56PE、CD2FITC、CD4PE、CD5FITC、CD7PE、CD19FITC、CD10PE、CD20FITC、CD22PE、HLA-DR FITC、CD33PE、CD11bFITC、CD14FITC，为Coulter-Immunotech公司产品； CD34FITC、CD13PE、CD11cPE、CD15PE，为PHARMINGEN公司产品。 　　1.3 仪器 FACS Vantage流式细胞仪（BD公司）。 　　1.4 样品的制备 100μl全血加20μl抗体，室温避光孵育20min，加2ml溶血素，孵育10min，PBS洗二次，置4℃冰箱待检。 　　1.5 流式分析 FACS Vantage流式细胞仪氩离子激光器，激发波长488nm。在CD45 PC5对侧向散射光（SSC）散点图中，用门（gate）圈出各个细胞群体，分析各个细胞群体的抗原标记物的表达量，收集测定细胞20000个。 　　2 结果与讨论 　　利用流式细胞仪进行免疫分型，最重要的一个标记物就是CD45，众所周知，CD45是人类共同的白细胞抗原标记，它的表达与否、强弱高低与细胞的成熟度有关，原始细胞和幼稚细胞在向成熟细胞分化过程中，CD45表达的荧光强度递增，因此利用流式细胞仪特有的SSC（侧向散射信号）和CD45两个参数就可在流式图谱中鉴别至少4个细胞群体：淋巴细胞群体、单核细胞群体、粒细胞群体、原始或幼稚细胞群体［1，2］。由于流式细胞仪可以任意圈出一个细胞群体进行细胞的免疫表型分析，因此用门（gate）圈出各个细胞群体，结合T系、B系、髓系各个抗原标记物，即可鉴别群体所在系列及其分化阶段。 　　　本文这例形态学最初诊断为AA的病例，曾进行两次免疫表型分析。第一次免疫分型时，就已发现有异常细胞群体的存在，见图1，两群异常细胞群体(Blast1和Blast2) 约占有核细胞群体60%，粒系