预防性添加胰蛋白酶抑制剂对大鼠胰岛分离纯化影响.pdfVIP

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内蒙古医学院学位论文原创性声明 郑重声明:本人所呈交的学位论文是在导师指导下,独立进行研究所取得的研究成 果。除文中特别加以标注引用的内容外,本论文内容不包含其他个人或集体已经公开发 表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确 方式标明。本人学位论文与资料若有不实,愿意承担一切相关的法律责任。 1 、_,叼J, 论文作者签名宝约笪 驴夕年∥月/日 , 学位论文版权使用授权书 本人完全了解学院有关保留、使用学位论文的规定,同意学院保留并向国家有关部 门或机构送交论文的复印件和电子版。学院享有发表、复制、查阅、借阅及申请专利等权 利。可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。同时本人保证:毕业 后发表、使用学位论文以及结合学位论文研究课题再撰写的文章,作者署名单位一律为 内蒙古医学院。 论文作者签名—垃 揪臌掣 o7年 否月 f日 p7年钼二日 预防性添加胰蛋白酶抑制剂对大鼠胰岛分离纯化的影响 长期以来,I型糖尿病及其慢性并发症,一直严重威胁着人类的健康和生命,胰岛素 的发现及其临床应用虽然可有效降低糖化血红蛋白的水平,减缓血管并发症的发生,但 是不能完全避免其发生,且易出现低血糖、血糖波动,甚至昏迷,危及生命。胰腺移植能 获得生理性的血糖调节,但手术创伤大,并发症凶险,有一定死亡率【I.2】。胰岛细胞移植 治疗糖尿病,可以有效控制血糖,改善血糖的生理代谢,从根本上解决糖尿病的并发症, 而且手术简单,创伤小,不需处理外分泌腺,可以对移植物进行移植前预处理,增加移植 物成活率[3】,成为最有前景的治疗糖尿病的方法,而如何提高胰岛移植物的数量和质量 是胰岛移植成功与否的关键[4。鼍。胰岛分离过程中产量较低是多方面因素造成的,而 胶原酶的消化过程最为重要。将胰岛细胞从丰富的外分泌腺泡中分离出来,不可避免会 造成胰腺外分泌部的破坏,多种消化酶会在此过程中释放出来影响胰岛的形态、功能、数 量,而胰蛋白酶对胰岛破坏最为严重。在胰岛提取过程中预防性添加蛋白酶抑制剂,可 能会抑制胰蛋白酶对胰岛细胞的损伤,提高胰岛细胞提取的数量和质量。 本研究在已有改进的胆管胶原酶法的基础上【7】,在大鼠胰岛分离过程中预防性添加 蛋白酶抑制剂乌司他丁,在胰岛细胞数量、糖刺激释放等方面与原方法进行对比,探索新 的胰岛分离优化条件。我们进行了相关的实验研究,现作出报告如下: 1.实验材料与方法 1.1实验动物,试剂及器材 研究中心o 1.1.2实验试剂及药品: 胶原酶V 分析纯 Sigma公司 Ficoll400 分析纯Pharmcia公司 RPMll6.∞ 分析纯 Gibcog公司 KRBB 分析纯 Gibcog公司 双硫腙(DIE) 分析纯 上海试剂总厂 吖啶橙(AO) 分析纯 Sigma公司 3 囱鐾直匿堂医亟±婴塞生堂垡迨塞(兰堂生2 碘丙啶(PI) 分析纯 Sigma公司 也I胰岛素放射免疫试剂盒 天津九鼎公司 标准胎牛血清 天津灏洋生物制品有限责任公司 D—H锄J【s液

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