大蒜素单独及及顺铂联用对人子宫内膜癌lshikawa细胞影响.pdf

中文摘要 数据均用SAS软件包进行统计。P0．05为差异有显著性意 义。 结果：1．大蒜素、顺铂和大蒜素+顺铂对ishikawa细 胞增殖情况的影Ⅱ向：本实验结果显示，当顺铂浓度为2．5、 5．0 mg／L时，对细胞的生长有明显的抑制作用，与对照组比 较，差异有极显著性意义(P0．01，Table1)。当顺铂浓度 与对照组比较，差异无显著性意义(p0．05)。即顺铂在该 浓度时对细胞生长无影响。而大蒜素和大蒜素+顺铂组均对 细胞有明显的抑制作用(p0．0l，table2、3、4)，且在两组 内随着时间和浓度的增加，增殖抑制率升高，增殖抑制率与 时间和浓度之间具有显著正相关性(p0．01，)。各浓度的大 蒜素单独作用后的细胞抑制率低于与之相对应的大蒜素和 顺铂联合作用下的增殖抑制率，两者相比，差异有显著性意 义(p0．01，Fig．1、2)。 2．大蒜素和大蒜素+顺铂对ishikawa细胞的生长周期 (15．17±2．63)％、(28．67±2．19)％、(43．07±1．12)％。与对 照组相比，两组G。／M期细胞含量比例上升，凋亡率亦上升。 大蒜素联合顺铂组较单独使用大蒜素组，其G：／M期细胞含量 和凋亡率明显升高(p0．01)，且各组内差异亦有显著性意 中文摘要 3．工shikawa细胞的形态学观察：(1)倒置显微镜观察： 对照组细胞生长状态良好，细胞伸展，呈不规则多角形，随 时间推移，细胞渐增多，细胞接触紧密。24h时细胞数目较 少，但形态尚可。随时间推移，细胞浆内出现空泡，培养至 72h时，细部明显皱缩，体积变小，细胞间隙增大，培养液 内可见少量细部悬浮，部分细胞可见碎裂的细胞核，而胞浆 姬姆萨染液染色后，光学显微镜下可见对照组细胞形态良 好，胞浆粉红色，胞核为蓝紫色，内有3—4个核仁，胞膜、 胞核完整，可见到较多核分裂相。大蒜素组和大蒜素十顺铂 组细胞呈凋亡细胞形态学改变，多数细胞表现为细胞皱缩， 细胞核固缩、深染，染色质边集，聚集于核膜周围或呈新月 状(Fig．5、6)。(3)透射电镜观察细胞超微结构：对照组细 胞很少见到凋亡纽i胞和凋亡小体，细胞器完整。大蒜素组和 大蒜素+顺铂组细胞体积变小，胞浆浓缩、颜色变深，粗面 内质网有不同程度的扩张；细胞核异染色质密度增高、边聚， 部分细胞核的染色体密度集聚成块状在核膜下边集，有的呈 月牙状，细胞核断裂，可见由膜结构包裹的小体，内含有细 胞器和染色质碎片，即为凋亡小体(Fig．7、8)。 4．工shikawa细胞端粒酶活性的表达：经不同浓度的大 蒜素处理24、48、72h后，细胞中端粒酶的活性呈现出随时 间和浓度增加而降低的趋势，而大蒜素联合顺铂组细胞中端 粒酶活性的降低较单纯使用大蒜素更明显，且与对照组比 较，其差异有显著性意义(p0．01)。 中文摘要 现棕黄色颗粒为阳性染色，经不同浓度的大蒜素处理24、48、 72h后，细胞中bc卜2的含量呈现出随时间和浓度增加而降 低的趋势，而大蒜素联合顺铂组细胞中bc卜2的含量降低较 单纯使用大蒜素更明显，两者相比差异有显著性意义(p 1、 0．01)，且各组内差异亦有显著性意义(p0．01，Fig．1 12)。 结论：大蒜素对子宫内膜癌ishikawa细胞具有抑制增 殖、促进调亡作用；大蒜素对顺铂具有增敏作用，大蒜素+ 顺铂显示抑制细胞增殖并诱导凋亡的作用较单纯应用大蒜 素明显增强；大蒜素诱导ishikawa细胞凋亡的调控与细胞 端粒酶表达之间存在密切联系，bc卜2可能是联系细胞凋亡 和端粒酶调节之间的重要纽带。大蒜素联合顺铂与单独应用 大蒜素相比，大蒜素可增强顺铂对端粒酶活性的抑制作用， 促进细胞的凋亡率；上述结论为临床上联合应用大蒜素，减 少化疗药物的使用及其副反应，并达到同样甚至更好的治疗 效果提供了理论依据。 关键词：子宫内膜癌；大蒜素；顺铂；凋亡；端粒酶； bcl—2 英文摘要 ofallicinand on of Effects