Survivin基因表达及其RNAi对人脑胶质瘤生物学特性的影响.pdf

雨日军医大掌博士掌位论文 抗凋亡以及血管形成中的作用尚不完全清楚。基于此，本课题从以下四个方 面进行了研究。 lSurvivin及其剪接变异体Survivin．AEx3、Survivin．2B mRNA在人脑 胶质瘤中的表达及意义：采用反转录聚合酶链反应(RT-PcR)方法检测了 Survivin及其剪接变异体Survivin—AEx3、Survivin．2B mRNA在4株人脑胶质 Survivin一2B 及Survivin．2B mRNA mRNA 在人脑胶质瘤组织中表达阳性率分别为67．7％、30．6％和17．7％，三者在正常 mRNA表达阳性率在人脑胶 人脑组织中均无表达。Survivin和SuⅣjvin．AEx3 质瘤及正常人脑组织之间分别具有非常显著差异(P0．01)和显著差异 (Po．05)，Survivin．2B mRNA表达阳性率在人脑胶质瘤及正常人脑组织之 mRNA表达阳性率在良性和恶性脑胶质瘤 间无显著差异(，0．05)。Survivin 之间以及脑胶质瘤I一Ⅳ级病理级别间都具有非常显著差异(P均O．01)， Survivin-AEx3及Survivin，2BmRNA表达阳性率在良、恶性脑胶质瘤之间以 及脑胶质瘤不同病理级别间均无显著差异(P均O．05)。Survivin、 mRNA表达阳性率与患者性别、年龄、肿瘤大 Survivin．AEx3及Survivin-2B mRNA在人脑胶质瘤 小及部位无明显关系(尸均0。05)。结果提示Survivin 中高表达，并与脑胶质瘤的发生和发展密切相关；Survivin-AEx3及 Survivin一2B mRNA在人脑胶质瘤中也有一定表达，但在脑胶质瘤发生和发展 中的作用有限。 2Survivin蛋白表达与人脑胶质瘤临床病理学特征、增殖、凋亡以及血 管形成的关系：采用免疫组化SABC方法检测了Survivin蛋白在4株人脑胶 例正常人脑组织中的表达水平。结果显示，Survivin蛋白在U25l、U87及 BT325细胞中均有表达，在SHG．44细胞中无表达。Survivin蛋白在人脑胶质 瘤及正常人脑组织中的表达阳性率及免疫反应评分(mS)分别为57．8％、 有非常显著差异(P均o．01)。Survivin蛋白表达阳性率及mS在良性和恶性 第四军医大掌博士掌位论文 脑胶质瘤之间以及脑胶质瘤I～Ⅳ级病理级别间都具有非常显著差异(P均 o．01)。Survivin蛋白表达阳性率及IRS与患者性别、年龄、肿瘤大小及部位 无明显关系(P均O．05)。Survivin蛋白表达水平与Survivin mRNA表达水平 无明显差异(PO．05)。进一步采用免疫组化SABC方法检测了增殖细胞核抗 原(PCNA)以及八因子相关抗原(FVⅢRAg)在脑胶质瘤组织中的表达，采 用TUNEL方法检测了脑胶质瘤组织中凋亡细胞；分别计算脑胶质瘤增殖指 数(PI)、凋亡指数(AI)、总体日常生长水平(ODG)以及微血管密度(MVD)。 IRS呈显 明显高于阴性组(P均0．01)，且PI、ODG以及MVD与Survivin 但AI与Survivin 脑胶质瘤中高表达，并与脑胶质瘤的形成与演进以及与脑胶质瘤的恶性增殖、 抗凋亡以及血管形成密切相关。 3Survivin基因RNAi对人脑胶质瘤细胞体外增殖以及凋亡的影响：根 sh