废用性骨质疏松后神经递质SP含量变化对OPG、RANKL表达影响.pdfVIP

山西医科大学硕士学位论文 前言 density)下降，骨骼的脆性增加，极易发生骨折为特征的全身 构破坏，因此导致骨强度(bone 性或局部性疾病【11，分为原发性和继发性两种。废用性骨质疏松属于继发性骨质疏松。 废用性骨质疏松定义为由于神经损伤，肌肉不活动以及负重减少引起的骨量丢失，依 原因和环境因素不同可影响整个或部分骨骼系统。常见于截瘫，外周神经损伤等【2】。 有关骨质疏松的发病机制的研究，国内外有许多报道，但至今仍然对骨质疏松的发病机 制未能认识清楚，并且对于该病的防治仍未彻底解决。骨质疏松是骨重建失调所致，骨重 建失衡即骨吸收增加和骨形成减少，是由破骨细胞和成骨细胞调节的。自1997．1999年发现 体细胞表达的RANK结合，引发细胞内一系列活动，从而促进破骨细胞分化、成熟及阻止 间的信号传导来发挥抑制骨吸收功能的。 Euler在马脑组织提取液中发现，但是直到1971年才被 P物质(sP)最早在1931年Von Pro．GinGlI卜_Ph Chang等提纯并分析得到其分子结构(Arg-Pro-Lv 神经递质，主要分布于中枢神经系统和外周神经系统，在人体多种骨组织内分布有sP样神 经纤维，包括长骨、关节、牙齿等，以代谢活跃的部位分布最多如骨膜、干骺端及骺板附 近，而在骨干处的皮质和骨髓则相对较少。这些肽能神经主要与血管伴行，有少数游离神 经末梢伸出并止于骨膜衬里细胞层、骨髓细胞团等，其作用的靶细胞为成骨细胞和破骨细 胞等。SP对组织的代谢及因子调节起重要作用。既然sP能作用于成骨细胞和破骨细胞，那 表达是否失调?鉴于以上原因，本课题进行了以下研究：(1)运用去神经方法来制造废用性 情况，同时研究三者之间是否存在相关关系及关系如何。 山西医科大学碗士学位论支 材料与方法 1、 实验仪器设备 骨密度检测仪(DEXA) 美国NORLAND公司 LeicaRM2015切片机 德国莱卡公司 DA．2000数码显微图象分析系统 山西医科大学生理教研室 光学显微镜 日本OLYMPUS公司 倒置相差显微镜 日本OLYMPUS公司 手提式高压蒸汽消毒锅 上海医用核子仪器 TISSUE．TEK,TEC5组织包埋机、冷台 日本樱花 AB204．S精密天平 瑞士梅特勒索一拖利多 TISSUE-TEK II旋转式自动脱水机 日本樱花 2、 实验试剂 兔抗鼠P物质多克隆抗体 武汉博士德公司 兔抗鼠OPG多克隆抗体 武汉博士德公司 兔抗鼠RANKL多克隆抗体 武汉博士德公司 免疫组化试剂盒7 北京中山生物技术有限公司 青霉素钠粉针 河北华北制药厂 水合氯醛 山西省儿童医院 甲醛、无水乙醇、二甲苯、3096过氧化氢(H202)．琼脂糖等均为国产分析纯试剂。 3、 动物饲养和来源 中心，饲养于通风透光的环境下，自由摄食自来水和标准大鼠饲料。饲料由山西医科大学 动物中心生产并提供。