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蕨高效愈伤组织无性系的建立与环境因子对愈伤组织分化的影响
Dykeman等发现荚果蕨(Mattcuacia
strutMoyeris)的最佳增殖培养基是
1/2MS,而单个芽的生长最有利的培养基是3/4MS”…。Biguchi等认为”“.
nidu一全量雌是最佳的.MS培养基中添加磷元素,Harper””称此培养基
为MF删,现在已有商品化生产肝删培养基。在培养基中添加磷酸钠盐,
有利于波斯顿蕨试管苗的增殖,MS+NaH。PO。200×106有利丁-两种肾蕨丛生
苗的生长。在波斯顿蕨的组织培养中,曾宋君““采用懈培养基,获得了
丛生芽,进一步分化出苗。在肾蕨的组织培养中,Higuchi采用1/4MS无
机盐的效果最佳,鸟巢蕨的培养Higuchi认为全量的Ms效果最佳。苏建宇
““用1/2MS对蕨的组织培养中诱导出GGB,进一步丛生芽,分化出苗。在
黑心蕨组织培养中获得了丛生芽并且分化出苗。在山菜蕨的组织培养中,
赵彦方““用1/2MS附加NailtP04200mg/L、活性碳1.59/L诱导山不定芽丛,
并分化出苗。Hwa“”等的研究表明风尾蕨的配子体在l/2糙上只能增殖,
只有将它被转移到1/IOMS上才诱导分化形成孢子体。
3植物生长调节剂
对于l肾蕨属根状茎尖的离体培养,诱导不定芽的产生和成苜,不需添加
任何植物生长调节剂,但CTK、KT、NAA有利于芽的形成和增殖,并可影响
S Y,et
试管苗的再生途径,而BA起抑制作用。Chen a1.”71在Rumohm
adiantfformfs的组织培养中也发现BA对芽的形成和增殖有抑制作用。
teformafurcan曲试
Beck等指出,KT影响鱼尾肾蕨(NephroJepJs妇Ica
管苗的增殖,并对鱼尾肾蕨的激素需求量做了详细的研究,结果证明
KTI~2mg/L+N从0.01mg/L的组合对芽的增殖和丛生苗的形成是最有利的
…。在波斯顿蕨的试管苗继代增殖过程中,往往需要添加一定量的KT,
并且在研究中发现,KT比BA更加有利于试管苗的增殖”…。对于荚果蕨的
根状茎组织培养, KTI~2mg/L的浓度是芽生长增殖的最佳浓度,反而NAA
对芽的生长增殖无促进作用…。其它几种蕨类的组织培养中,Harper发现,
激素的最佳组合是KT和NAA,KT的浓度i-2mg/L,NAA的浓度0.1~lOmg/L”“。
BA对于蕨类植物组织培养的作用也是非常重要的。BA促进蜈蚣草
(Pteris
vittata)、二叉角鹿蕨…茎端叶片形成不定芽。强烈抑制鸟巢
蕨和肾蕨属植物试管苗的发生,有利于GGB的形成和增殖。BA可以改变外
植体和试管苗的再生途径。1987年前,在蕨类植物组织培养中普遍采用
Murashige””等1962年提出的途径,外植体一芽或无根苗一丛生芽一完整
芽一移栽。1987年,Higuchi”“等在研究肾蕨根状茎尖离体培养后提出一
种崭新的途径,根状茎尖一苗~GGB一完整苗一移栽。1987年以后,这种
方法应用在多种蕨类植物的组织培养中,例如鸟巢蕨”“、鹿角蕨”““。、乌
exaltata)”…、风
毛蕨(BlechmunSoican幻“5、皱叶肾蕨(Nephrolepsis
尾蕨(Ptersisensiformis)””等。对于诱导愈伤组织,分化培养的培养基
中的BA的浓度一般采用l~3mg/L。Hwa””等以鹿角蕨的配子体为材料,用
高浓度的BA或KT分别诱导了两种颜色不同的愈伤组织,一种暗绿,另一
种黄绿。并且这两种愈伤组织可以在含2,4-0的培养基上继代保持,但放
7
蕨高教愈伤组织无性系的建立与环境困了对愈伤组织分化的影响
在Ms基本培养基上,暗绿的愈伤组织会分化出配子体,黄绿的愈伤组织
会分化出孢子体。
单独使用N3A抑制鸟巢蕨组织GGB的形成,但可诱导苗的但可诱导苗
的形成”“。对于波斯顿蕨根的发育,NAA的浓度为lmg/L时的效果是最好
的…1。在蕨诱导、分化、继代培养、壮苗培养、诱导生根的培养基中,NAA
的浓度为0,2~lmg/L时的效果是最佳的。在培养基中加入0.3~O.5mg/L的
lAA时,对波斯顿蕨
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