癫痫一号对戊四唑点燃癫痫模型大鼠c-fos和c-jun蛋白表达影响附：中药及中西医结合治疗癫痫系统评价.pdfVIP

识到肝风、痰、热、惊恐及脏气不平对痫病的发生演变有重大影响。金元时代，中医学进入新 的发展时期，理论上有了新突破。明清时期对癫、痫、狂加以区别，明确了痫病病位在脑髓， 理、法、方、药逐渐完善。近代医家认为，癫痫一病，多属本虚标实，以上盛下虚的证候为多。 当今中医临床更是从诊疗规范、辩证论治、疗效机理等方面于本病做了许多开创性工作， 并显示了中医药治癫痫的特色和疗效优势。现代中医认为本病由先天因素、惊恐、劳伤过度、 血瘀、痰浊等导致气逆夹火，扰动神明，痰浊蒙蔽，瘀阻脑窍而发痫病。临床研究也表明，中 医药对癫痫有很好的治疗作用。在现代有关癫痫的实验研究中，张林挺等[4]研究了栝楼桂枝汤 [5] 对戊四氮点燃癫痫大鼠大脑内c-fos 和c-jun 水平的影响；张丽萍等 研究了草果知母汤对戊 四唑慢性诱导癫痫模型大鼠脑内海马区凋亡调控因子p53 蛋白及Bcl-2、Bax 蛋白表达的影响； [6] 张文英等 报道了中药宁痫煎剂对电点燃癫痫模型大鼠c-fos 蛋白的表达、细胞凋亡、氨基酸 [7] 内神经递质及NMDAR1 和GABA-AR α1 的影响；贺娟等 报道了草果知母汤在阻断点燃模型形成 过程中对NMDA 受体及其mRNA 的影响等等。 作为及早反映基因c-fos 基因的蛋白产物，Fos 蛋白已被广泛用作神经元兴奋性的标记 物，多种因素可诱导中枢神经系统中c-fos 的表达：外科手术、脑皮层缺血、脑内局部刺激、 多巴胺激动剂、吗啡、热休克、脑皮质内注射神经生长因子、白介素、雌激素及内啡肽等。多 种癫痫发作可诱导c-fos 基因的表达，研究表明，抗癫痫药物可抑制该基因的表达。Gass 等[8] 用Bicuculline 静脉注射诱发大鼠癫痫发作后，海马区Zif/268、c-fos 蛋白质表达很快增高， 2hr 达高峰，8hr 恢复至基础水平；fos-B、c-JUN、JUN-B、JUN-D 蛋白质表达也有类似变化。 [8] 王布尔等 在海马青霉素致癫模型上观察了诱发癫痫后的改变以及电针后脑内c －fos 蛋白的 变化。结果表明，诱发癫痫时动物海马CA1 区、齿状区、梨状皮层、杏仁核见到较多的c －fos 蛋白表达。 本实验所选药物癫痫一号是我院近30 年用于治疗癫痫的院内制剂，其功能以清热解毒、 熄风定惊、凉血清痰为主。已在临床应用近30 年，诊治病人近万例，取得了较好的疗效。药 物的主要成份为青黛、重楼、硼砂、山药等。本制剂在我院运用于临床治疗癫痫发作已有明显 的疗效，但目前尚无相关的实验室药效数据。本课题采用戊四唑点燃SD 大鼠制作癫痫发作模 型，通过行为观察，脑电图，免疫组化法测定c-fos 蛋白及c-jun 蛋白来评定癫痫一号的临床 疗效，运用随机对照原理探讨该药对实验性癫痫大鼠治疗的有效性，为临床治疗提供更科学、 更确切的理论依据，为癫痫的治疗提供中医药新途径和新方法。 2 实验研究 1.实验材料 1.1 实验动物 健康成年Sprague-Dawley （SD）大鼠120 只，3 个月龄，雌雄各半，体重（200±10）g， 由成都中医药大学实验动物中心提供。 1.2 饲养及饲养环境 饲料喂养，自由摄食、饮水，室温20℃-25℃，空气流通。饲料及饲养环境由成都中医药 大学附属医院15 楼实验中心提供。 1.3 主要实验仪器及设备 电子分析天平 ：BP61 型，Sartorius 德国 编号：9985053 F1000 型电子天平：美国双杰兄弟集团有限公司 编号：9985064 断头器 ： 浙江宁海白石医疗仪器 编号：087-76 恒温箱：日本 编号 生物显微镜：日本 编号：2005008 组织切片机：编号 1.4 实验药物与试剂 戊四唑（注射剂，0.1/支）由成都科比特生物技术有限公司提供。批号：13644 癫痫一号片（0.3g/片）成都中医药大学附属医院 批号：070614 卡马西平片（0.1g/片）上海三维制药有限公司 批号 免疫组化试剂盒 成都科比特生物技术有