叶绿体DNA的遗传变异斟.PDFVIP

维普资讯 第 24卷 第 5期 作 物 学 报 Vo1．24．N0．5 l998年 9月 ACTA AGRONOM ICA SINICA Sep．，l998 I]LO一 应用RAPD技术研究不同种山羊草 叶绿体DNA的遗传变异 ．斟 』2、㈦ 王 洁 陈 孝 倪丕冲 赵进东、 吴光耀 ’ 提 要 采用随机扩增多态性 DNA(RAPD)技术研究了山羊草届cpDNA的遗传变异性 用改 良 的 高盐低pH法”提取了 lj种山羊草材料和一种二粒小麦的叶绿体DNA，并建立 了重复性较好的 RAPD标准分析条件。在此标准条件下，检测了 l6个材料叶绿体 DNA 的多态性 。经 l0个引物扩增 ． 在得到的 64个片段中，有6个片段是 l6个材料共有的，多志性达 90％。聚类分析结果显示 ，关系较 近的有小亚山羊草和欧山羊草，粘果山羊草和易变山羊草，高太山羊草和拟斯卑尔脱山羊草 及偏凸 山羊草和粗山羊草 粗 山羊草种 内叶绿体 DNA存在着一定程度的变异性 。本研究将 l6个材料的 cpDNA分成 10个类型，与前人用限制性内切酶对cpDNA的分类结果基本吻台。不同的是本研究认为 关系较密切 的高太山羊草和拟斯卑尔脱山羊草叶绿体DNA类型不同，而小伞山羊草却与具有相同 cpDNA类型的其它山羊草种关系较远。 ． 十 7『 y ；里 关键词 —J羊草属；叶绿~．DNA；RAPD j尺 1≥ ^ 『， — 一 — — — — … 山羊草属 (AegitopsL．)是小麦近缘植物中与小麦亲缘关系最为密切的属，在小麦的进化 中起着重要的作用。山羊草属主要是根据桉染色体组类型而分类的，依据细胞质的异同而进 行 的分类研究还很少 ．Tsunewaki。。_用普通小麦的异源细胞质系研究了不同细胞质的生物学 效应，将几乎所有小麦和山羊草属的细胞质分为 12个类型。由于cpDNA 的简单性、保守性， 使叶绿体DNA 比较适合于种间类型的划分及系统发生的研究。Ogihara和Tsunewakin用 13 种限制性 内切酶，将小麦属和山羊草属的42个品系的cpDNA分成 17个类型，并且分析了这 17种叶绿体DNA类型之间的系统发育关系。这些研究为山羊草属和小麦属细胞质的遗传多 样性提供了分子水平上的依据 RAPD技术 以其简单、快速、灵敏的特点，在植物系统分类 等遗传关系的研究上得到了广泛的应用，但是，将 RAPD技术应用到山羊草属种间叶绿体基 因的多态性检测上，至今未见报道 本文拟通过对 cpDNA 的RAPD分析，(1)探讨RAPD 技术在检测山羊草叶绿体DNA多态性上的可行性}(2)研究山羊草属不同种间叶绿体DNA 的亲缘关系，并对山羊草属叶绿体 DNA 的类型进行初步的分类。 1 材料与方法 1．1 植物材料 实验材料包括 15种山羊草和一种野生二粒小麦，各材料的主要特性见表 1 + 国家 自然科学基金资助项 目 车研究在北京大学生命科学学院分子及发育系实验室完成．特此致谢 收稿 日期：1996—12—02，收到修改稿 日期：199712o1 维普资讯 5期 王 洁等：应用RAPD技术研究不同种山羊草叶绿体 DNA的遗传变异 521 1 尾鞍山羊草