选修一生物5.1DNA的粗提取与鉴定学案（人教版）.docVIP

选修一生物5.1DNA的粗提取与鉴定学案（人教版） 题1　DNA的粗提取与鉴定1．尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取。 2．了解DNA的物理、化学性质。 3．理解DNA粗提取及DNA鉴定的原理。一、提取DNA 1．提取生物大分子的基本思路 选用一定的物理或化学方法分离具有不同__________性质的__________。对于DNA的粗提取而言，就是要利用DNA与______、______和______等在__________性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。 2．DNA粗提取主要利用了DNA的溶解性和耐受性两个方面 （1）利用DNA的溶解性。DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的________中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使______充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。 在________ Nal溶液浓度下，DNA的溶解度最小。 此外，DNA不溶于______溶液，但是细胞中的某些蛋白质能溶于其中。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步分离。 （2）利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。蛋白酶能水解________，但是对______没有影响。大多数蛋白质不能忍受________ 的高温，而DNA在____ 以上才会变性。洗涤剂能够__________，但对DNA没有影响。 二、DNA的鉴定 在________的条下，DNA遇________会被染成____色，因此________可以作为鉴定DNA的试剂。 三、实验设计 1．实验材料的选取 原则上，凡是含有______的生物材料都可以考虑，但是，选用__________________的生物组织，成功的可能性更大。 思考：生活在牧区的人们，采集牛、羊和马血比较方便，他们用牛、羊、马血做提取DNA的实验材料合适吗？为什么？ 2．破碎细胞，获取含DNA的滤液 动物细胞的破碎比较容易，以鸡血为例，在鸡血细胞液中加入一定量的________，同时用________搅拌，过滤后收集______即可。如果实验材料是植物细胞，需要先用______溶解________。例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的________和______，进行充分地搅拌和研磨，过滤后收集________。 3．去除滤液中的杂质 最初获得的DNA滤液含有蛋白质、脂质等杂质，需要进一步提纯DNA。 方案一：利用DNA在不同浓度的Nal溶液中溶解度的不同，在滤液中加入Nal，使Nal溶液物质的量浓度为________，过滤除去______的杂质；再调节Nal溶液物质的量浓度为________，析出______，过滤去除________的杂质；再用物质的量浓度为________的Nal溶液溶解DNA。 方案二：利用蛋白酶分解蛋白质，不分解DNA的特点。在滤液中加入嫩肉粉，嫩肉粉中的__________能够分解蛋白质。 方案三：利用蛋白质和DNA的变性温度不同的特点。将滤液放在________ 的恒温水浴箱中保温10～1 in，过滤获得DNA滤液。 4．DNA的析出与鉴定 将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积______的、冷却的________（体积分数为9%），静置2～3 in，溶液中会出现__________，这就是粗提取的DNA。用玻璃棒__________搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分。 取两支20 L的试管，各加入物质的量浓度为________的Nal溶液 L，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入4 L的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热 in，待试管冷却后，比较两支试管中溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变____。 四、操作提示 1．以血液为实验材料时，每100 L血液中需要加入3 g________，防止________。 2．加入洗涤剂后，动作要______、______，否则容易产生__________，不利于后续步骤的操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要______，以免加剧DNA分子的______，导致DNA分子不能形成________。 3．二苯胺试剂要________，否则会影响鉴定的效果。 答案：一、1物理或化学　生物大分子　RNA　蛋白质　脂质　物理和化学 2．（1）Nal溶液　DNA　014 l#8226;L－1　酒精 （2）蛋白质　DNA　60～80　80　瓦解细胞膜 二、沸水浴　二苯胺　蓝　二苯胺 三、1DNA　DNA含量相对较高 思考：不合适。因为哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核，仅靠白细胞和淋巴细胞中的少数DNA，在实验中很难提取到。 2．蒸馏水　玻璃棒　滤液　洗涤剂　细胞膜　洗涤剂　食盐　研磨液 3．2 l#8226;L－1　不溶　01