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　　探讨西南交大实习论文范文发酵生产DHA工艺研究实习论文 探讨西南交大实习论文范文发酵生产DHA工艺研究实习论文_导读： 发酵生产二羟丙酮工艺研究学号胡钟星 班级：2010 级生物工程四班 合：罗建孟、胡钟星、吴运鑫、肖晗、董娥 摘 要 1,3-二羟丙酮（DHA）是一种重要的医药化工中间体，在精细化工、食品工业、化 妆工业和水质净化等方面有着广泛的应用前景。 目前 DHA 已经被广泛的应用于保湿防晒 化装品中；在低血糖与与糖尿病的治疗上，限量口服 DHA 与葡萄糖相比，DHA 能更大幅 度的提高呼吸频率，增大氧气消耗，有效地防止过量β -羟基丁酸及乙酰乙酸的形成。 此外 1,3-二羟基丙酮衍生物是一类非常重要的中间体： 可用于羟醛缩合反应制取各种手 性化合物；经生物或化学法还原可得到具有光学活性的仲醇；直接用于光学反应中的 Diels Alder 加成反应制备糖类化合物或经进一步的反应用于该类加成反应；与卡宾发 生插入反应； 与 2,2-二烷氧基丙烷衍生物作用制备内酯； 用于制备一些桥环化合物进而 开环得到众多有用的环状化合物。 DHA 通过甘油转化获得，制备方法已从过去的化学合成法转向微生物发酵法。 在国 外，微生物发酵生产 DHA 已得到了大规模的工业应用，国内近年来有微生物转化甘油生 产 DHA 的报道，与国外相比，菌株产率较低，无法达到工业生产的要求。 关键词：二羟丙酮；微生物发酵法；影响因素 正一、引言 文 二经基丙酮或1,3 一二经基丙酮，英文名为1,3-dihydroxyacetone 或 dihydroxyacetone， 简写为DHA,是最简单的三碳酮糖， 外观是白色或类白色粉末状结晶， 具有甜、凉的味道， 易吸湿并分解。 一般状态下是二聚体(1,4-Dioxane)的结晶，能缓 慢地溶于1 份水中或15 份乙醇中，微溶于乙醚，但经溶解或加热则变为单体，其单体 易溶于水、 乙醇、 丙酮和乙醚等有机溶剂， 熔点为75—80℃， 水溶性gt;250 g/L-1(20℃)，1 在pH 为6.0 时稳定，是一种重要的化工、生化原料，医药、农药合成中间体和多功能 食品添加剂，用途十分广泛。 DHA 的生产方法主要有化学合成和微生物发酵两种方法: 1.1 化学合成法最常见的二轻基丙酮化学合成方法主要有一溴丙酮酯化醇解法和1,2 一丙二醇的 氧气或K2Cr2O7/H2SO4氧化法两种。 前者反应条件温和、 合成用生产设备要求低且简单、 产品收率高、产品纯度高，但主原料一溴丙酮的价格导致生产成本过高是该方法的最大 缺点；后者与前者刚好相反，反应条件及设备要求高、需要用昂贵的金属催化剂、产品 收率不高，但原料成木低并可连续化或半连续化生产。 1.2 微生物发酵法与化学合成法相比，微生物发酵生产DHA 具有专一性强、反应条件温和、底物利用 率高、生产工艺相对简单、副产物少，同时微生物发酵制备的DHA 可应用于食品和医药 工业领域等优点，成为人们研究的 5 探讨西南交大实习论文范文发酵生产DHA工艺研究实习论文_(2)导读： 重点。 本文所叙述的就是采用发酵工艺生产二羟丙酮 以及初始PH对发酵法生产二羟基丙酮的影响。 二、实验内容1.5L、10L、70L发酵罐发酵生产二羟基丙酮配料、灭菌、接种操作过程实验 2.二羟基丙酮标准曲线制作及发酵液中二羟基丙酮含量的测定 3.不同发酵条件(主要为PH)对微生物生产二羟基丙酮影响的研究 三、实验材料及操作3.1 实验材料3.1.1 菌种：氧化葡萄糖酸杆菌GL58 3.1.2 斜面菌种保存培养基（%）： 甘油5.0，葡萄糖5.0，酵母膏1.0，碳酸钙0.3，琼脂1.8，PH6.0 3.1.3 发酵种子培养基（%）： 甘油5.0，葡萄糖5.0，酵母膏1.0，碳酸钙0.3，PH6.0 3.1.4 摇瓶发酵培养基（%）： 甘油12.0；酵母膏0.5；碳酸钙0.7，PH自然 3.1.5 试剂：显色液（浓硫酸：无水乙酸：二苯胺=6 mL:54 mL:0.6g）2 3.1.6 仪器：容量瓶，摇床，酸度计，比色皿，离心机，胶头滴管，三角瓶 3.2 实验操作3.2.1 显色液配置 取浓硫酸、无水乙酸、二苯胺按浓硫酸：无水乙酸：二苯胺=6 mL:54 mL:0.6g的比 例配置显色液180ml，配置时将浓硫酸倒入无水乙酸冷却后加入二苯胺。 3.2.2 二羟丙酮标准曲线制作 （1）DHA 系列标准溶液的配置 准确称取二羟丙酮标准品0.05g，用蒸馏水于100mL 容量瓶中定容，作为0.5mg/mL 的母液，按下表稀释 二羟丙酮的标准曲线 编号 母液量 （ml） 定容到 （ml） 溶液终浓 度 （mg/ml） A值 0.5 0.1 0.2 0.3 0.4 0.0 — 25 2