细胞工程练习题2.docVIP

第二章 细胞工程理论基础 第一节 细胞及其组成 细胞是一切生命活动的基本结构和功能单位。 1.?细胞是由膜包围的原生质（protoplasm）团，通过质膜与周围环境进行物质和信息交流； 2.?是构成有机体的基本单位，具有自我复制的能力，是有机体生长发育的基础； 3.?是代谢与功能的基本单位，具有一套完整的代谢和调节体系； 4.?是遗传的基本单位，具有发育的全能性 细胞的分子组成：无机物：水和无机盐 有机物：蛋白质、核酸、糖类和脂质 无机盐在细胞内以离子形式存在，参与酶促反应，维持渗透压。 二、细胞的结构组成（动物细胞） 细胞质，光面内质网（参与脂类合成），细胞核（遗传和发育），核膜，核仁，线粒体（细胞能量工厂），高尔基体（细胞的分泌活动和溶酶体的形成），粗面内质网（参与蛋白质的合成加工），核糖体（蛋白质合成的场所），细胞膜（维护内环境稳定、调节运输、信号检测与传递、参与细胞间相互作用、能量转换），中心体（参与细胞的有丝分裂） 三、细胞周期和细胞分裂 1.细胞周期：包括分裂期（M期）和间期（由G1期、S期与G2期组成）。 2. 细胞分裂方式：无丝分裂；有丝分裂；减数分裂 3. 细胞死亡 细胞死亡有两种方式：细胞凋亡与细胞坏死 细胞凋亡（apoptosis）：指机体为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序性死亡。 细胞坏死（necrosis）：是细胞受到物理因素（如热、辐射）、化学因素（如强酸、强碱、有毒物质）或生物因素（如病原体）作用，引起细胞无序变化的死亡过程。 细胞坏死与凋亡的形态区别 第二节 细胞培养的基本知识 一、细胞培养的基本概念和名词 组织培养（tissue culture）习惯上泛指所有的体外培养，即细胞培养、组织培养和器官培养的总称。其本意是指从活的机体中取出组织或细胞，模拟机体内生理条件，在体外建立无菌、适温和一定营养条件等，使之生存和生长，并维持其结构和功能的技术。 组织培养这一名词实际上是一个通用名词，其实际内容根据培养物的不同可概括为三个不同概念： A 细胞培养：将组织块用机械方法或酶解法分离成单个细胞，做成细胞悬液，再培养于固体基质上，成单层细胞生长，或在培养液中呈悬浮状态培养的技术称为细胞培养。 细胞培养的方式： 群体培养：将大量细胞悬液置于培养瓶中，让其贴壁或悬浮生长，汇合（confluence）后形成均匀的单细胞层或单细胞悬液。 克隆培养：将高度稀释的细胞悬液加入培养瓶中，各个细胞贴壁后，彼此距离较远，经过生长增殖每一个细胞形成一个细胞集落，称为克隆（clone）。 B 组织培养：指把活体的组织取出分成小块，直接置于培养瓶底培养或将胶原纤维血浆支持物铺于培养瓶底来进行培养。 培养结果是细胞从组织块周围长出，形成生长晕或形成由扁薄细胞构成的单层细胞培养物。当细胞由组织向外迁移时，组织难以长时间维持其原有结构，结果也就成了细胞培养。 C 器官培养：将活体器官或一部分器官取出，在体外生长、生存，并保持其原有结构和功能的培养技术。 思考题1：体外培养分为哪几种类型？ 细胞培养的方式： 群体培养：将大量细胞悬液置于培养瓶中，让其贴壁或悬浮生长，汇合（confluence）后形成均匀的单细胞层或单细胞悬液。 克隆培养：将高度稀释的细胞悬液加入培养瓶中，各个细胞贴壁后，彼此距离较远，经过生长增殖每一个细胞形成一个细胞集落，称为克隆（clone）。 第三节 细胞的特性 一、培养细胞的基本结构 细胞健康活跃：一般光镜下直接观察，细胞是均质而透明的。用相差显微镜可看清轮 廓和内部结构。 细胞状态不良：细胞轮廓增强，反差增大，细胞质中出现颗粒和空泡。 CPE——细胞病变效应。 二、培养细胞的生长方式和类型 按生长方式： 贴壁型生长细胞:附着在某一固相支持物表面才能生长的细胞。 悬浮型生长细胞:不必附着于固相支持物表面，在悬浮状态下即可生长的细胞。 （一）贴附生长型 依赖贴附才能生长的细胞叫做贴附型细胞或锚定依赖型细胞(Anchorrage-dependent cells)，这种现象与细胞分化有关。 贴附是大多数有机体细胞在体内生存和生长发育的基本存在方式。基于贴附特性，使细胞与细胞之间相互结合形成组织。 有机体的绝大多数细胞在体外必须贴附于固相表面才能生存和生长。 细胞在体内、体外的贴附方式：存在差异 体内：贴附是全方位外形具有复杂的立体特征 体外：细胞只有一个附着平面外形与在体内时明显不同 按照培养细胞贴附生长时的主要形态，可分为4种类型 成纤维型细胞(fibroblast) 上皮型细胞(epithlium cell type)游走型细胞(wandering cell type)多形型细胞 (polymorphic