遗传学实验(烟丝对绿豆染色体微核的影响).docVIP

石河子大学 烟丝浸出液对绿豆根尖细胞的诱导实验 院 系：农学院2011级园艺2班 姓 名：许立志、杨邦杰、胡大帅、张晓莹、郝玉杰 二 0 一 二 年 十一 月 烟丝浸出液对绿豆根尖细胞的诱导和检测 小组成员： 许立志 2011512242 杨邦杰 2011512219 胡大帅 2011512215 张晓莹 2011512226 郝玉杰2011512225 摘要：以等量清水浸泡不同量的烟丝得到不同浓度浸泡液，用烟丝浸泡液对绿豆种子进行处理，观察绿豆根尖细胞染色体是否发生结构畸变，并统计其根尖染色体的畸变情况。结果表明：高浓度的烟丝浸泡液能诱导绿豆根尖细胞染色体变异效果明显，说明吸烟有害健康。绿豆烟丝浸泡液染色体变异前言　　染色体是生物遗传物质的载体，它的结构、形态、功能是细胞遗传学中的核心内容。任何一个物种的染色体形态、结构和数目是相对稳定的，但绝非永恒不变。在自然条件下，某些环境因素的异常变化往往能引起植物染色体形态、结构和数目的变异。如果用物理、化学因素认为的处理植物，则可以大大提高变异频率。烟丝中含有烟焦油，尼古丁，氯化氢等有毒物质。本实验就是为了观察这些物质是否影响细胞的正常分裂，并引起染色体变异，从而进一步说明吸烟有害健康。实验目的1.是了解微核测定的方法与意义。 2.为寻找新的测试系统或测定更多的环境因素。实验器材、材料和药品： 1.0 试验材料当年产的新鲜种子　　(1) 取 5 只，各盛 300 毫升自来水，分别投入 支、 支、 支、支、支香烟浸泡数天，制成香烟浸出液。　　(2) 将同一品种的豆各 10 粒，浸泡在香烟浸出液中。 24 小时后，将浸泡后的绿豆种子放在垫有吸水纸的培养皿中培养，温度以 20 ～ 25 为宜，并继续用相应的香烟浸出液使吸水纸保持湿润。　　() 待时，于上午 9：00 或下午 2：00 左右剪取主根或侧根根尖 3 毫米长。这时细胞分裂比较旺盛。　　() 剪下根尖立即放入盛有 10% 盐酸的小玻璃皿中，在下解离 10 分钟左右，待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗 　　() 用改良苯酚品红染色 5 ～ 10 分钟，或用其它染液，如 1% 醋酸地衣红等染色 5 ～ 10 分钟。用清水洗去浮色后放在载玻片上，加一滴清水，加盖盖玻片，用手指均匀轻压，使细胞分散开来　　() 用高倍镜观察并统计细胞分裂后期正常细胞数和异常细胞数。假设与预期： 设计次实验旨在观察烟丝浸出液对微核的诱导，从而启示大家在日常生活中一方面注意烟丝浸出液的取用量，另一方面减少烟丝浸出液的污染。假设待测液能对细胞产生微核诱导，通过浓度梯度的设置，从低到高一次可看出微核出现数量的差异。烟丝浸出液浓度越小，诱导能力越低，微核数量越少；反之则微核数量相应增多。 实际结果：　　烟丝浸出液对豆根尖分生组织细胞有丝分裂的影响　　从压片镜检结果看，豆根尖分生组织细胞有丝分裂周期中，由于不同浓度浸出液的处理，使染色体发生了结构变异，出现了一些异常的现象。　　首先，镜检结果中正常细胞的结构所示。其次，在镜检的结果中发现了微核。微核是真核生物细胞中的一种异常结构，是染色体畸变在间期的一种表现形式。指位于细胞的细胞质中独立于主核，直径是主核的1/20～1/3，完全与主核分开的圆形或椭圆形的微小核[3]。据此统计得出染色体的变异率。烟丝浸泡液和对照组清水对绿豆根尖分生区细胞的作用，显示各组实验数据（表1）中，发现烟丝浸出液对绿豆染色体畸变有明显的影响，而且随着浓度的增高，染色体的变异率逐渐变大[4]。5支香烟的烟丝浸出液产生的变异率高达了13.0％ 一根烟丝（1支） 一根半烟丝（1.5支） 两根烟丝（2支） 通过观察以上图发现，烟丝浸出液对绿豆根尖的微核诱导有较明显的效果，两根烟丝浸出液的浓度相对最接近原液浓度，其中微核数量最多，说明高浓度的烟丝浸出液对细胞确实有一定诱导效应。随浓度的降低微核数也依次减少，说明适量的去用烟丝浸出液可以降低对细胞的伤害。烟丝浸出液对绿豆根尖的微核诱导有较明显的效果，两根烟丝浸出液的浓度相对最接近原液浓度，其中微核数量最多，说明高浓度的烟丝浸出液对细胞确实有一定诱导效应。随浓度的降低微核数也依次减少，说明适量的去用烟丝浸出液可以降低对细胞的伤害。 首先，培养的绿豆根尖长短有所不同，对于待测液的吸收利用能力不同，尽管实验中已尽量避免该因素可能造成的误差；其次，在微核诱导时会出现随诱导物浓度的升高，其微核率有逐渐上升再降低的趋势。 原因可能：低浓度时，随诱导物浓度的升高，染色体损伤的情况有所加大，导致微核率升高； 当诱导物浓度升高到一定程度时，会导致细胞分裂受阻，有