蝉拟青霉侵染小菜蛾幼虫SSH 文库的构建及免疫相关基因分析.pdfVIP

28(1)32-40 中国生物防治学报 Chinese Journal of Biological Control 2012 年 2 月 蝉拟青霉侵染小菜蛾幼虫SSH文库的构建 及免疫相关基因分析 1 1 1 1 1 2 3 1* 党向利 ，陈官菊 ，厉晓腊 ，刘又高 ，金轶伟 ，易辉玉 ，吕要斌 ，柴一秋 （1. 浙江省亚热带作物研究所/浙江省农业科学院亚热带作物种质创新与利用重点实验室，温州 325005 ；2. 华南农业大学动物科学学院， 广州 510642 ；3. 浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所，杭州 310021 ） 摘要：为探讨小菜蛾Plutella xylostella 对病原真菌入侵的免疫防御机制，利用抑制消减杂交技术构建蝉拟青霉 Paecilomyces cicadae 侵染的小菜蛾幼虫的抑制性差减文库，并对文库进行鉴定。ESTs 序列聚类分析共获得 412 个独立基因。通过同源比对，28.24% ESTs 为未知功能基因，71.76% ESTs 与已知功能基因序列相似，包 括免疫相关、金属离子结合和加工、核酸和蛋白代谢及加工、细胞信号、细胞结构、形状和流动、能量代谢、 胁迫和解毒以及其它基因。鉴定出39 个可能参与小菜蛾免疫蝉拟青霉侵染的免疫基因，包括：识别分子、蛋 白酶及蛋白酶抑制剂、效应因子及其它免疫基因。 qRT-PCR 结果表明肽聚糖识别蛋白、器官芽生长因子、葛 佬素、溶菌酶、酚氧化酶原激活蛋白酶 3 以及转铁蛋白基因均可诱导表达。免疫相关基因在不同微生物诱导 下的表达模式存在不同。结果表明当病原真菌蝉拟青霉侵染寄主小菜蛾后，小菜蛾体内发生了一系列的复杂 反应，小菜蛾抵御病原真菌侵染是一个多途径共同作用的复杂过程。该研究为进一步研究小菜蛾抵御病原真 菌入侵的分子机制提供基础信息。 关 键 词：小菜蛾；蝉拟青霉；天然免疫；SSH 文库；表达序列标签；诱导表达 中图分类号：S476.12; Q785; Q811.4 文献标识号：A 文章编号：1005-9261 (2012)01-0032-09 Construction of Suppression Subtractive Hybridization Library of Plutella xylostella Immunized by Paecilomyces cicadae and Analysis of Immune-related Genes 1 1 1 1 1 2 3 1* DANG Xiangli , CHEN Guanju , LI Xiaola , LIU Yougao , JIN Yiwei , YI Huiyu , LÜ Yaobin , CHAI Yiqiu (1. Key Laboratory of Subtropical Crops Germplasm Innovation and Utilization of Zhejiang Academy of Agri cultural Sciences, Zhejiang Institute of Subtropical Crops, Wenzhou 325005; 2. College of Animal Science, South China Agricultural University, Guangzhou 510642; 3. Institute of Plant Protection and Microbiology, Zhejiang Academy of A